去甲斑蝥素金刚烷胺衍生物（SU2162）的小肠吸收研究

发布时间：2017-04-09 00:17

  本文关键词：去甲斑蝥素金刚烷胺衍生物（SU2162）的小肠吸收研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本课题是在谭载友教授的专利[1,2]《一种抗肿瘤活性斑蝥素衍生物及其制备方法》及系列研究的基础上对SU2162进行肠吸收动力学研究。SU2162是去甲斑蝥素与金刚烷胺在N,N-二甲基甲酰胺中合成反应,进行酰亚胺化修饰获得的去甲斑蝥素衍生物。SU2162药效学的研究表明[1],它对神经胶质瘤生长具有显著的抑制作用(IC50=0.721 mmol·L-1)。谭载友教授等人[1,2]已对SU2162的合成路线进行优化,同时发表了SU2162两个晶体结构[3,4]、制备和相互转化的方法[5,6],并对该专利活性分子的组织分布和药代动力学进行了研究[7,8]。本课题建立了TLC鉴定SU2162的色谱条件,采用薄层层析GF254硅胶板(2.5*7.5cm),以石油醚:乙酸乙酯(1:1)展开剂,以碘-碘化钾溶液为显色剂,条件是在日光下检视,点样量为5μL。通过TLC和IR鉴定确认合成的SU2162是单一的目标产物。通过毛细管熔点法、DSC和PXRD测定确认SU2162的晶型。本课题通过测定SU2162的溶解度和油水分配系数,考察溶解性和膜渗透性,为下一步实验提供依据,对药物的体内吸收进行初步预测。结果SU2162在水溶液中的溶解度很差,几乎不溶或不溶;在甲醇、乙醇、丙二醇中的溶解度较小,仅为略溶状态;在乙腈、乙酸乙酯、丙酮和正辛醇中的溶解度较大,是溶解状态;在氯仿中的溶解度最大,达到易溶状态。正辛醇油水分配系数为1.3918,渗透性较好,在p H2.0、4.0、5.8、6.8、7.4、8.0、9.18的缓冲溶液中的表观油水分配系数分别为1.6812、1.6812、1.5480、1.4561、1.1252、1.1542、1.1308,说明SU2162的表观油水分配系数与p H值有负相关关系,且SU2162在胃肠道的渗透性较好。本课题建立了HPLC测定大鼠在体肠吸收灌流液中SU2162含量方法,选用Phenomine Genimi C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm),流动相为乙腈:水=60:40,流速1 m L·min-1,检测波长211 nm,进样体积20μL,室温条件下对肠灌流液中SU2162进行测定。结果显示,肠液中代谢产物和内源性物质均不干扰SU2162测定,SU2162峰型较好,最低检测限是0.06μg·m L-1,最低定量限是0.20μg·m L-1。其标准曲线回归方程为y=12905x+274.71,r2=0.9998;浓度为2.0μg·m L-1、10.0μg·m L-1、25.0μg·m L-1的SU2162日内精密度RSD分别为8.01%、3.76%、1.91%,日间精密度RSD分别5.88%、0.83%、0.88%,相对回收率分别为102.50%、99.43%和104.29%,符合方法学要求[9];浓度为2.0μg·m L-1、10.0μg·m L-1、25.0μg·m L-1的SU2162肠灌流液冻融稳定性RSD分别为2.90%、2.06%和3.70%,冷冻稳定性RSD分别为4.22%、3.25%和1.20%,SU2162在37℃空白肠灌流液中8 h内的稳定性RSD为2.47%,在37℃K-R液中8 h内的稳定性RSD为1.86%,在常温K-R液中8h内的稳定性RSD为1.97%,均符合稳定性要求[9]。该方法较适用于SU2162的体内药物分析。本课题对SU2162进行大鼠在体肠吸收研究,考察了不同吸收部位对SU2162大鼠肠吸收的影响。结果表明,SU2162在十二指肠、空肠和回肠的药物吸收速率常数(Ka)分别是(6.3380±3.3438)*10-2 min-1、(5.5379±1.3096)*10-2 min-1、(6.3600±1.0246)*10-2 min-1;SU2162在十二指肠、空肠和回肠的药物表观渗透系数(Papp)分别为(5.2955±2.5040)*10-3cm·min-1、(4.9784±0.9761)*10-3cm·min-1、(5.3688±1.0076)*10-3cm·min。SU2162在十二指肠、空肠和回肠各肠段之间的药物吸收速率常数Ka和药物表观渗透系数Papp比较均无显著性差异(P0.05)。说明SU2162在全肠道的吸收较好,且无明显吸收部位。
【关键词】：(3aRS 4S 7R 7aS)-4 7-环氧六氢-2-(三环[3.3.1.1 3 7]癸烷)-1H-异吲哚-1 3(2H)-二酮 SU2162 肠吸收 单向灌流法 合成与鉴定
【学位授予单位】：广东药学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R96
【目录】：

• 攻读学位期间发表的论文4-10
• 中文摘要10-12
• Abstract12-14
• 前言14-28
• 1 癌症综述14-20
• 1.1 癌症的基本类型和发病机理14-16
• 1.2 治疗癌症的方法和抗癌药物的概况16-20
• 2 口服药物肠吸收的研究现状20-23
• 2.1 肠襻法20-21
• 2.2 在体循环法21
• 2.3 单向灌流法21
• 2.4 外翻肠囊法21-22
• 2.5 体外扩散池法22
• 2.6 Caco-2 细胞模型法22-23
• 3 潜在新活性分子SU2162 的概述23-25
• 3.1 SU2162 的合成方法23-24
• 3.2 SU2162 的药理作用24
• 3.3 SU2162 的晶体学研究24
• 3.4 SU2162 的体内药动学研究24-25
• 3.5 SU2162 的体内组织分布研究25
• 4 立项依据25
• 5 研究思路25-26
• 5.1 SU2162 的鉴定和晶型制备25
• 5.2 SU2162 理化性质研究25
• 5.3 SU2162 生物样品分析方法学的建立25-26
• 5.4 SU2162 大鼠在体小肠吸收的研究26
• 6 创新点26-28
• 第一章 SU2162 的合成、晶型制备和鉴定28-44
• 1 实验材料与仪器28-29
• 1.1 实验仪器28-29
• 1.2 实验仪器29
• 2 SU2162 的合成29-31
• 2.1 实验步骤29-31
• 2.1.1 金刚烷胺的预处理29
• 2.1.2 SU2162 合成29-31
• 3 SU216 的鉴定31-37
• 3.1 薄层色谱法的测定31-37
• 3.1.1 显色剂的选择31-35
• 3.1.1.1 显色剂的配制和方法31-33
• 3.1.1.2 显色剂的考察33-35
• 3.1.2 展开剂的选择35-36
• 3.1.3 SU2162 的薄层鉴别36-37
• 3.1.3.1 SU2162 药液供试品溶液的制备36
• 3.1.3.2 薄层色谱条件及结果36-37
• 3.2 红外光谱的鉴定37
• 4 SU2162 单斜晶型的制备37
• 5 SU2162 单斜晶型的鉴定37-42
• 5.1 熔点的测定40-42
• 5.1.1 毛细管熔点法测定40-41
• 5.1.2 差示扫描量热法（DSC）测定41-42
• 5.2 粉末X-射线衍射法（PXRD)测定42
• 6 本章总结与讨论42-44
• 第二章 SU2162 理化性质的研究44-60
• 1 实验材料与仪器44-45
• 1.1 实验试剂44-45
• 1.2 实验仪器45
• 2 SU2162 近似溶解度的测定45-46
• 3 SU2162 在不同比例的乙醇水溶液中溶解性的研究46-50
• 3.1 色谱条件46-47
• 3.2 溶液的配制47
• 3.3 专属性、标准曲线和精密度考察47-49
• 3.4 SU2162 在不同比例的乙醇水溶液中溶解性49-50
• 4 SU2162 增溶方法考察50-54
• 4.1 色谱条件50-51
• 4.2 SU2162 增溶方法考察51-54
• 4.2.1 实验试剂的配制51
• 4.2.1.1 SU2162 标准储备液的配制51
• 4.2.1.2 SU2162 标准溶液的配制51
• 4.2.1.3 Krebs-Ringer缓冲液的配制51
• 4.2.2 乙醇和丙二醇51-52
• 4.2.3 乙醇和吐温 8052-54
• 5 SU2162 油水分配系数的测定54-59
• 5.1 不同pH值的缓冲溶液的配制54
• 5.2 色谱条件54-55
• 5.3 专属性、标准曲线和精密度考察55-57
• 5.4 供试品溶液的制备与分配实验57-59
• 6 本章总结与讨论59-60
• 第三章 SU2162 生物样品分析方法学的建立60-74
• 1 实验材料与仪器60-61
• 1.1 实验动物60
• 1.2 实验试剂60-61
• 1.3 实验仪器61
• 2 实验试剂的配制61-62
• 2.1 Krebs-Ringer缓冲液的配制61-62
• 2.2 SU2162 标准储备液的制备62
• 2.3 SU2162 供试液的配制62
• 2.4 大鼠空白肠灌流液采集62
• 2.5 大鼠肠灌流液采集62
• 3 方法学的考察62-72
• 3.1 色谱条件62-63
• 3.2 样品处理方法63
• 3.3 检测波长的选择63-64
• 3.4 流动相的选择和专属性64-67
• 3.5 标准曲线的绘制67-68
• 3.6 灵敏度68
• 3.7 精密度68-69
• 3.8 相对回收率69-70
• 3.9 样品稳定性70-72
• 3.9.1 冻融稳定性70
• 3.9.2 冷冻稳定性70-71
• 3.9.3 药物 37℃条件下在空白肠灌流液中的稳定性71
• 3.9.4 药物 37℃条件下在K-R液中的稳定性71-72
• 3.9.5 药物常温下在K-R液中的稳定性72
• 4 本章总结与讨论72-74
• 第四章 SU2162 大鼠在体小肠吸收的研究74-90
• 1 实验材料与仪器74-75
• 1.1 实验动物74
• 1.2 实验试剂74-75
• 1.3 实验仪器75
• 2 实验试剂的配制75-76
• 2.1 Krebs-Ringer缓冲液的配制75-76
• 2.2 SU2162 标准储备液的制备76
• 2.3 SU2162 供试液的配制76
• 3 大鼠小肠在体单向灌流实验76-88
• 3.1 肠壁物理吸附的考察76-77
• 3.2 灌流管对药物吸附考察77-85
• 3.2.1 采用硅胶管作为灌流管对SU2162 吸附情况77-78
• 3.2.2 灌流管材料的筛选78-80
• 3.2.3 采用进口复合弹性软管作为灌流管对SU2162 吸附情况80-84
• 3.2.4 实验前管道平衡时间的考察84-85
• 3.3 实验方法85
• 3.4 灌流液体积校正85-86
• 3.5 数据处理86
• 3.6 统计学处理86
• 3.7 不同肠段对药物吸收的影响86-88
• 4 本章总结与讨论88-90
• 第五章 全文总结90-94
• 参考文献94-102
• 附录102-164
• 附录1 检测波长的选择102-105
• 附录2 流动相的选择105-110
• 附录3 标准曲线110-112
• 附录4 灵敏度112-113
• 附录5 精密度113-118
• 附录6 相对回收率118-121
• 附录7 药物稳定性121-130
• 附录8 动物实验图谱130-164
• 致谢164

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 吴艳红;王慧茹;邓振领;葛科立;张叔人;;肿瘤生物免疫治疗研究进展[J];科技导报;2014年26期

2 闫文丽;黄兆胜;曾晓会;赵自明;黄雪君;杜铁良;;单向灌流法研究姜黄素的大鼠在体肠吸收[J];今日药学;2012年03期

3 吴益平;霍美蓉;周建平;;水飞蓟素-两亲性壳聚糖胶束的制备及其大鼠在体肠吸收[J];药学学报;2009年06期

4 廖正根,平其能,萧伟,梁新丽;桂枝茯苓胶囊中有效成分的大鼠在体肠吸收研究[J];中国天然药物;2005年05期

5 许蕾;杨中林;;大鼠在体单向灌流法研究橙皮苷肠道吸收性质[J];中国药学杂志;2009年08期

6 沈凯,王景田;药物肠吸收实验研究方法进展[J];中国新药杂志;2003年12期

7 何承华;张振海;王舒;周建平;吕慧侠;;芹菜素大鼠在体肠吸收动力学的研究[J];中国中药杂志;2013年09期

8 饶小勇;龚明;尹姗;罗晓健;简晖;冯育林;杨世林;;白头翁皂苷D在大鼠肠道的吸收行为研究[J];中草药;2013年24期

9 温然;陆洋;杨冰;李慧云;赵雪姣;杜守颖;;醒脑静不同制剂给大鼠鼻单向灌流后龙脑和麝香酮吸收比较研究[J];中草药;2013年20期

10 赖乐;莫红缨;赖春丽;;体外扩散池法评价银杏酮酯磷脂复合物体外透过性能研究[J];中国药业;2013年21期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 李和伟;多成分环境对中药口服吸收影响的评价方法研究[D];北京中医药大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 贝煜;北五味子总木脂素肠吸收与调控机制研究[D];广州中医药大学;2011年

2 赵静文;仙茅中苔黑酚葡萄糖苷的分离及其肠吸收研究[D];北京中医药大学;2012年

3 华素;穿心莲提取物的胃肠道吸收研究[D];河南大学;2013年

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