紫杉醇PLGA口服纳米粒的制备及生物利用度的研究

发布时间：2017-06-01 06:09

  本文关键词：紫杉醇PLGA口服纳米粒的制备及生物利用度的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】： 紫杉醇(Paclitaxel,TAX)是抗肿瘤药物,在临床上已得到广泛应用,特别是对乳腺癌、卵巢癌的治疗作用明显。由于其水溶性差,临床使用的紫杉醇注射液中的紫杉醇是靠聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)与无水乙醇以1:1的混合液来稳定和溶解。但聚氧乙烯蓖麻油可促进组胺释放,常引起严重的过敏反应和其他不良反应。为了解决上述问题,研究不含Cremophor EL并能提高紫杉醇生物利用度的制剂成为当前的热点。把紫杉醇制备成口服纳米给药系统后,则不仅能减少毒副作用,增加其稳定性,而且方便储存和运输。本文制备了紫杉醇纳米粒(TAX-NPs),优化了其处方和制备工艺,并对其进行了体内外评价。主要内容和结果如下: 1.建立了紫杉醇样品HPLC测定方法,并对其线性范围、精密度、回收率等进行了验证,结果表明该方法符合分析要求。 以生物可降解聚合物——聚丙交酯乙交酯共聚物(PLGA)为载体,采用乳化-分散法制备了TAX-NPs;以纳米粒的粒径和包封率为评价指标,考察了处方及其工艺因素对制剂质量的影响;对TAX-NPs的基本性质,体外稳定性和释药特征进行了考察;用差示扫描量热法(DSC)及X射线粉末衍射(XRD)分析了紫杉醇在纳米粒中的存在状态,TAX-NPs的平均粒径为(99±7.6)nm,Zeta电位为(78.3±5.87)mV,包封率和载药量分别为(56.99±0.29)%和(7.04±0.13)%。冻干TAX-NPs在4℃放置6个月稳定性良好。DSC及XRD表明TAX以分子形态被有效地包裹在纳米粒中。TAX-NPs在两种不同的pH值PBS释放介质中进行体外释放,以模拟生物体内环境,在pH值越低的条件下,药物释放越快,这对于载药纳米粒在偏酸性的肿瘤环境下发挥抗肿瘤作用非常有利。 2.研究Caco-2细胞对纳米粒的摄取及其影响因素,以评价此种纳米粒作为口服抗肿瘤药物载体的可行性。通过包裹疏水性荧光探针香豆素-6(Coumarin-6,Cou-6)标记纳米粒,采用荧光酶标仪检测细胞内Cou-6的荧光强度,研究粒径,、孵育时间,、纳米粒浓度,、纳米粒的表面性质对Caco-2细胞摄取纳米粒的影响。采用激光共聚焦显微镜观察Caco-2细胞对纳米粒的摄取。与聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)做乳化剂制备的纳米粒相比,双十二烷基二甲基溴化铵(Didodecyldimethyl ammonium bromide,DMAB)作为乳化剂制备的纳米粒显著增加了Caco-2细胞对纳米粒的摄取率,细胞对粒径为100 nm左右的纳米粒的摄取率最高。结果证明纳米粒可经胃肠道给药吸收入血。 3.利用大鼠在体肠吸收动力学实验,研究了紫杉醇纳米粒及其原料药在肠道的吸收情况,吸收动力学方程分别为:紫杉醇纳米粒lnX_(剩余)=lnX_0-0.154×t;紫杉醇原料药:lnX_(剩余)=lnX_0-0.0023×t,相关系数r分别为0.9460和0.9102。二者的吸收具有显著性差异(P＜0.05),紫杉醇纳米粒在小肠中的吸收速率常数明显大于紫杉醇原料药。 4.建立了紫杉醇的血药浓度测定方法。色谱条件为:色谱柱:Diamonsil C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈/水(47:53,v/v);柱温:30℃;检测波长:227nm;流速:1.0ml/min;进样量:20μl。高、中、低浓度回收率分别为91.23%、92.68%、89.38%。日内RSD分别为3.81%、3.49%、2.89%,日间RSD分别为5.12%、4.59%、3.48%。最低定量浓度为0.02μg/ml。所建立方法适合紫杉醇血药浓度的测定。 以健康的SD大鼠为受试对象,紫杉醇注射液为参比制剂,采用随机对照方法,研究纳米粒在动物体内的生物利用度。实验结果表明紫杉醇纳米粒绝对生物利用度为19.5%,说明用纳米载药系统传输紫杉醇促进了紫杉醇的吸收,提高了其口服生物利用度。
【关键词】：紫杉醇 聚丙交酯乙交酯共聚物 纳米粒 Caco-2细胞 在体肠吸收 生物利用度
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R943
【目录】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-16
• 第一章 绪论16-46
• 1.抗肿瘤药物紫杉醇的研究16-24
• 1.1 历史与现状16-17
• 1.2 紫杉醇的抗癌机理17
• 1.3 紫杉醇制剂研究进展17-21
• 1.4 临床应用21-24
• 2.纳米粒给药系统24-36
• 2.1 纳米粒用作药物载体的显著优点24-25
• 2.2 纳米粒的种类25-26
• 2.3.纳米粒的制备方法26-32
• 2.4 纳米粒在医药领域中的应用32-36
• 3.本课题的立题依据及研究意义36-38
• 参考文献38-46
• 第二章 紫杉醇口服纳米粒的制备及特性研究46-65
• 1 材料与仪器46-47
• 1.1 材料46
• 1.2 仪器46-47
• 2 实验方法47-52
• 2.1 TAX的基本性质47
• 2.2 体外分析方法的确立47-48
• 2.2.1 检测波长的选择47
• 2.2.2 色谱条件47
• 2.2.3 标准曲线的制备47
• 2.2.4 精密度47-48
• 2.2.5 最低检出限与最低定量限48
• 2.3 TAX-NPs的制备48
• 2.4 冷冻干燥工艺考察48
• 2.5 纳米粒的载药量与包封率的测定48-49
• 2.5.1 测定方法48-49
• 2.5.2 液相色谱系统的可行性验证49
• 2.5.3 方法回收率49
• 2.6 正交设计49-50
• 2.6.1 单因素实验49-50
• 2.6.2 正交优化设计50
• 2.6.3 最优处方工艺验证50
• 2.7 TAX-NPs的基本性质考察50-51
• 2.7.1 形态观察50-51
• 2.7.2 粒径和Zeta电位测定51
• 2.7.3 包封率与载药量的测定51
• 2.7.4 X-射线粉末衍射分析51
• 2.7.5 差示扫描量热法分析51
• 2.8 TAX-NPs体外稳定性考察51
• 2.9 TAX-NPs体外释药特征考察51-52
• 3 结果与讨论52-64
• 3.1 体外分析方法的确立52-53
• 3.1.1 检测波长的选择52
• 3.1.2 标准曲线的制备52
• 3.1.3 精密度52-53
• 3.2 冷冻干燥工艺考察53
• 3.2.1 添加剂种类的影响53
• 3.2.2 添加剂浓度的影响53
• 3.3 纳米粒的载药量与包封率的测定53-54
• 3.3.1 液相色谱系统的可行性验证53-54
• 3.3.2 方法回收率54
• 3.4 正交优化设计54-58
• 3.4.1 单因素实验54-57
• 3.4.2 正交优化设计57-58
• 3.4.3 最优处方工艺验证58
• 3.4 TAX-NPs的基本性质58-64
• 3.4.1 TAX-NPs的粒径、Zeta电位与形态58-60
• 3.4.2 包封率与载药量的测定60
• 3.4.3 X-射线粉末衍射(X-)分析60-61
• 3.4.4 差示扫描量热法分析61-62
• 3.4.5 TAX-NPs体外稳定性考察62
• 3.4.6 TAX-NPs体外释药特征考察62-64
• 4 本章小结64-65
• 第三章 Caco-2细胞对纳米粒的摄取研究65-72
• 1 材料与仪器65-66
• 1.1 材料65-66
• 1.2 仪器66
• 2 实验方法66-67
• 2.1 Cou-6-PLGA-NPs的制备66
• 2.2 Caco-2细胞的培养66
• 2.3 细胞对纳米粒的摄取66-67
• 2.4 激光共聚焦扫描显微镜67
• 3 结果与讨论67-70
• 3.1 细胞对纳米粒的摄取研究67-70
• 3.2 激光扫描共聚焦70
• 4 本章小结70-72
• 第四章 紫杉醇纳米粒大鼠在体肠吸收试验研究72-77
• 1 材料与仪器72
• 1.1 材料72
• 1.2 仪器72
• 2 实验方法72-74
• 2.1 供试液与酚红液的配制72-73
• 2.2 剂量的选择73
• 2.3 肠循环液中酚红浓度的测定73
• 2.4 肠循环液中紫杉醇的含量测定73
• 2.5 在体肠吸收试验影响因素73-74
• 2.6 在体肠吸收试验74
• 3 结果与讨论74-76
• 3.1 酚红标准曲线的制备74
• 3.2 液相色谱系统的可行性验证74-75
• 3.3 在体肠吸收试验75-76
• 4 本章小结76-77
• 第五章 紫杉醇口服纳米粒大鼠体内生物利用度研究77-84
• 1 材料与仪器77
• 1.1 材料77
• 1.2 仪器77
• 2 实验方法77-79
• 2.1 血浆中紫杉醇测定方法的建立77-79
• 2.1.1 色谱条件77
• 2.1.2 标准溶液的配制77-78
• 2.1.3 血样供试品的处理78
• 2.1.4 方法专属性考察78
• 2.1.5 标准曲线的制备78
• 2.1.6 精密度试验78
• 2.1.7 提取回收率试验78-79
• 2.1.8 稳定性试验79
• 2.2 大鼠体内生物利用度研究79
• 3 结果与讨论79-83
• 3.1 血浆中紫杉醇测定方法的建立79-81
• 3.1.1 方法专属性考察79-80
• 3.1.2 标准曲线和线性范围80
• 3.1.3 精密度80-81
• 3.1.4 提取回收率81
• 3.1.5 稳定性81
• 3.2 大鼠体内生物利用度研究81-83
• 4 本章小结83-84
• 全文总结84-86
• 参考文献86-89
• 致谢89-90
• 攻读硕士学位期间发表的相关论文目录90

【引证文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 应景艳;徐爱仁;徐锦龙;马卫成;;紫杉醇PLGA纳米粒注射剂对小鼠肺转移黑色素瘤的治疗作用[J];医药导报;2012年07期

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 薛静;聚（乳酸—羟基乙酸）共聚物纳米粒药物载体的制备及性能研究[D];华南理工大学;2011年

2 杨晓燕;透明质酸修饰载紫杉醇纳米脂质载体的研究[D];山东大学;2012年

3 江伟民;新型聚乙二醇接枝聚乳酸纳米粒作为亲水和疏水类药物载药系统的研究[D];重庆大学;2012年

  本文关键词：紫杉醇PLGA口服纳米粒的制备及生物利用度的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：411849