外泌体内PD-L1在GDLBCL中的表达及其在免疫微环境中的作用

发布时间：2024-07-02 23:05

　　目的:通过研究外泌体(exosomes)内细胞程序性死亡配体1(Programmed cell death ligand 1,PD-L1)在胃弥漫性大B细胞淋巴瘤(Gastric diffuse large B-cell lymphoma,GDLBCL)细胞培养上清液、正常胃黏膜细胞培养上清液、GDLBCL患者以及正常健康人血浆中的表达水平,探究exosomes内PD-L1在GDLBCL中的诊疗作用。进一步通过转染方法过表达及沉默GDLBCL的exosomes中PD-L1,来研究其对免疫微环境的作用。方法:收集GDLBCL患者和健康人的血浆,并培养正常胃黏膜细胞、GDLBCL细胞系,采用ExoQuick试剂法提取细胞培养上清液和血浆中外泌体,然后经过超速离心纯化,并使用透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)拍摄提取的外泌体,蛋白印迹法(Western blot)实验及纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA)检测提取的外泌体,再利用Western blot检测细胞培养上清液和血浆外泌体内P...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图4-1细胞培养上清液中外泌体的鉴定NTA测定血浆外泌体的粒径(nm)(A)；WesternBlot检测细胞培养上清液中外泌体的标志

16第4章实验结果4.1细胞培养上清液外泌体的鉴定在提取细胞培养上清液中的外泌体后，我们进行了外泌体NTA检测，结果表明：外泌体的直径主要集中在70至120nm的范围内，并且基本呈正态分布（图4-1A）。WesternBlot检测到细胞培养上清液中外泌体的标志蛋白CD9和CD63....

图4-2细胞培养上清液外泌体内的PD-L1表达水平

17节外泌体内PD-L1的表达水平。图4-2细胞培养上清液外泌体内的PD-L1表达水平通过Westernblot测定GDOHH-2、GOCI-LY3和GES-1培养上清液外泌体内PD-L1的表达水平(A)；用PD-L1过表达质粒和PD-L1干扰质粒以及质粒空载转染胃弥漫大B细胞淋....

图4-3血浆外泌体的鉴定血浆外泌体标志蛋白CD9和CD63的表达，β-actin被用作内参(A)

17节外泌体内PD-L1的表达水平。图4-2细胞培养上清液外泌体内的PD-L1表达水平通过Westernblot测定GDOHH-2、GOCI-LY3和GES-1培养上清液外泌体内PD-L1的表达水平(A)；用PD-L1过表达质粒和PD-L1干扰质粒以及质粒空载转染胃弥漫大B细胞淋....

图4-4血浆外泌体内PD-L1的表达水平正常健康志愿者血浆外泌体中PD-L1的表达水平和胃弥漫大B细胞淋巴瘤患者血浆外

184.4血浆外泌体内PD-L1的表达水平胃弥漫大B细胞淋巴瘤患者血浆外泌体内PD-L1的表达水平与正常健康志愿者血浆外泌体内PD-L1的表达水平的比较：WesternBlot检测结果显示，胃弥漫大B细胞淋巴瘤患者血浆外泌体内PD-L1的表达水平高于正常健康志愿者血浆外泌体内PD....

本文编号：4000148