环巴胺阻断Hedgehog信号通路对人食管癌EC109细胞上皮间质化逆转的影响及机制

发布时间：2017-07-20 03:15

  本文关键词：环巴胺阻断Hedgehog信号通路对人食管癌EC109细胞上皮间质化逆转的影响及机制

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【摘要】：目的：探讨环巴胺阻断Hedgehog通路对人食管癌EC109细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,即EMT)的作用及其可能机制。方法：实验分为实验组和对照组,实验组应用Hedgehog通路特异性阻断剂环巴胺作用食管癌EC109细胞48 h。通过real-time PCR检测Gli1的表达变化,观察细胞形态变化,通过血管拟态实验检测血管形成能力变化,Transwell小室迁移和侵袭实验、黏附实验分别检测细胞迁移、侵袭和黏附能力变化,real-time PCR及Western印迹方法检测EMT相关标志物E钙粘蛋白(E-cadherin)、β连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)及EMT调控因子Snail、Twist1等的表达变化。结果：环巴胺阻断EC109细胞Hedgehog信号通路Gli1的mRMA表达明显减少为(41.819±20.150)%,形态发生明显变化,血管拟态个数较对照组[(2.780±0.424)vs.(5.080±0.634)]明显减少(t=-16.919,P=0.000),侵袭实验较对照组[(24.800±2.588)vs.(55.400±4.879)]和迁移实验较对照组[(23.200±1.924)vs.(65.400±4.775)]均明显减少(t=-12.390,P=0.000；t=-18.331,P=0.000),同种细胞间黏附增强(F=9.327,P=0.009),上皮表型标志物E-cadherin表达较对照组[(0.3877±0.5648)vs.(0.2275±0.5823)]明显上调(t=3.421,P=0.027),而间质表型Vimentin、β-catenin的表达水平较对照组[(0.5877±0.1091)vs(0.5071±0.0509)；(0.9983±0.1284)vs(0.7556±0.0379)]明显下调(t=4.221,P=0.013；t=6.781,P=0.002)：与对照组相比,实验组细胞中转录因子Snail的表达较对照组[(0.4013±0.0205)vs.(0.7556±0.0379)]下调(t=6.774, P=0.002), Twistl的mRNA表达量相对于对照组也明显下调为(74.987±9.031)%。结论：环巴胺阻断Hh信号通路能明显逆转EC109细胞EMT过程,其机制可能与下调转录因子Snail及Twistl表达有关。
【关键词】：食管癌 环巴胺 Hedgehog 上皮间质化 细胞黏附
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.1
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-12
• 1 材料和方法12-22
• 2 结果22-27
• 3 讨论27-29
• 全文总结29-30
• 参考文献30-32
• 文献综述32-44
• 参考文献37-44
• 致谢44-45
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文45

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本文编号：566037