顺铂联合低分子肝素对人肺腺癌A549细胞增殖及bcl-2、bax表达的影响

发布时间：2017-07-20 19:22

  本文关键词：顺铂联合低分子肝素对人肺腺癌A549细胞增殖及bcl-2、bax表达的影响

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【摘要】：目的：作为第一代铂类化疗药物,顺铂为周期非特异性药,其主要是与DNA链内及链间交联,干扰DNA的复制,最终导致细胞死亡,而目前的研究却发现顺铂的抗肿瘤毒性与诱导细胞凋亡有关。低分子肝素作为一种重要的抗凝物质,除了其抗凝作用以外,近年发现其具有抗肿瘤、抗炎症、抗病毒等生物学作用,特别是抗肿瘤作用受到学者关注,其抗肿瘤凋亡机制成为近年来研究热点。目前大多实验仅仅只是对顺铂或是低分子肝素两药各自凋亡的研究,尚未见其联合用药的相关研究报道,因此,本基础实验旨在观察顺铂联合低分子肝素预处理人肺腺癌A549细胞的作用,并对其可能的增殖抑制、凋亡机制等进行初步探讨,从而为临床上肺癌的化疗提供更有效的方案及理论依据,以提高晚期肺癌患者的生命质量。方法：采用HyClone改良型RPMI-1640培养基对人肺腺癌A549细胞进行体外培养,然后放置于5%C02、37℃恒温孵育箱中孵育,取对数生长期细胞实验。按实验设计分为实验组和对照组,实验组分为顺铂组(DDP组：浓度为2ug/ml),低分子肝素组(LMWH组：浓度为：10ug/ml),顺铂联合低分子肝素组(DDP+LMWH组：浓度为2ug/ml+10ug/ml),对照组不加顺铂和低分子肝素。采用MTT实验方法,分别在48h,72h两个时间点检测各实验组与对照组吸光度值,计算增殖抑制率,比较各组两两之间的差异；采用流式细胞仪技术检测各实验组与对照组细胞凋亡率,比较各组两两之间的差异；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测量各实验组与对照组细胞中bcl-2蛋白和bax蛋白含量,比较各组两两之间的差异；结果：1.增殖抑制率：DDP+LMWH组对A549细胞增殖抑制作用强于DDP组和LMWH组单独的抑制率(P0.05,n=10),分别与对照组有统计学差异(P0.05,n=10),且72h抑制作用比48h更明显；2.凋亡率：DDP+LMWH组诱导A549细胞凋亡作用强于DDP组和LMWH组单独的凋亡作用(P0.05,n=3),且分别与对照组有统计学差异(P0.05,n=3)；3.bcl-2蛋白：DDP+LMWH组作用下调了A549细胞中bcl-2蛋白的表达,且强于DDP组和LMWH组单独的下调作用(P0.05,n=10),与对照组比较差异有统计学意义(P0.05,n=10);4.bax蛋白：DDP+LMWH组作用上调了A549细胞中bax蛋白的表达,并且强于DDP组和LMWH组单独的上调作用(P0.05,n=10),与对照组比较差异有统计学意义(P0.05,n=10)；结论：1.顺铂联合低分子肝素能够有效的抑制体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖,并且其抑制作用优于单独使用顺铂和低分子肝素；2.顺铂联合低分子肝素能够有效诱导体外培养的人肺腺癌A549细胞株细胞凋亡,诱导作用优于单独使用顺铂和低分子肝素；其机制或许是通过下调bcl-2蛋白,上调bax蛋白的表达来实现的。
【关键词】：顺铂 低分子肝素 肺癌 增殖 bcl-2 bax
【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-8
• 前言8-11
• 材料与方法11-21
• 结果21-30
• 讨论30-39
• 结论39-40
• 参考文献40-47
• 英汉缩略词对照表47-48
• 致谢48-49
• 铂类药物与肺癌化疗的临床研究进展(综述)49-59
• 参考文献55-59

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本文编号：569619