新型表皮生长因子受体抑制剂抗T790M型非小细胞肺癌作用

发布时间：2017-07-28 14:01

  本文关键词：新型表皮生长因子受体抑制剂抗T790M型非小细胞肺癌作用

  更多相关文章： 受体 表皮生长因子 蛋白酪氨酸激酶类 癌 非小细胞肺 抗肿瘤活性 H1975细胞 T790M

【摘要】：目的:通过H1975和A431细胞的体外细胞增值抑制实验,从7个FCN系列表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)中筛选出高活性、高选择性化合物,并进一步评价其体内外抗肿瘤作用。方法:(1)首先采用MTS法对非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)H1975细胞(T790M突变)进行体外增殖抑制试验对7个FCN系列化合物进行初步筛选,得到抗肿瘤活性强的化合物。(2)采用MTS法继续对初步筛选出来的3个高活性化合物在人表皮鳞癌A431细胞(WT-EGFR)中进行筛选,得到选择性更好的化合物。(3)采用流式细胞仪检测筛选化合对H1975细胞周期和凋亡的影响。(4)采用划痕实验观察筛选化合物对H1975细胞迁移能力的影响。(5)通过H1975细胞裸鼠移植瘤实验明确筛选化合物在体内对肿瘤生长的影响。结果:(1)与阳性对照物AZD9291对照,初步筛选出3个具有抑制H1975细胞增殖生长的高活性化合物:FCN12、FCN14和FCN15,半数抑制浓度(IC50)分别为(103.33±12.10)、(115.17±7.69)和(128.63±32.72)nmol·L-1,细胞抑制作用呈浓度依赖性。(2)经体外细胞抑制试验进一步筛选,与阳性对照物AZD9291对照,结果发现FCN12和FCN14对A431细胞无明显抑制作用(IC502μmol·L-1)。(3)经流式细胞仪检测结果显示:不同浓度的FCN12和FCN14对H1975细胞的周期分布不同,与DMSO对照组相比,均可显著将H1975细胞周期阻滞于G1期并呈浓度依赖性;同时FCN12和FCN14均可显著促进H1975细胞凋亡并呈浓度依赖性(P0.01)。(4)划痕实验结果显示,与DMSO对照组比较,FCN12和FCN14对H1975细胞的迁移抑制作用明显,并与AZD9291相当,同时具有较好的浓度依赖性(P0.05)。(5)体内移植瘤实验结果显示FCN12、FCN14可以明显抑制肿瘤的生长并缩小肿瘤体积(P0.01)。结论:经过筛选得到的EGFR-TKIs:FCN12和FCN14,具有明显的体内外抗肿瘤活性并具有较好的选择性,对于治疗T790M型EGFR突变非小细胞肺癌具有良好的开发前景和市场应用价值。
【关键词】：受体 表皮生长因子 蛋白酪氨酸激酶类 癌 非小细胞肺 抗肿瘤活性 H1975细胞 T790M
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 第一部分：MTS法筛选高活性、高选择性FCN化合物12-20
• 1 材料与方法12-16
• 2 实验结果16-18
• 3 讨论18-20
• 第二部分：FCN12、FCN14对H1975细胞周期、凋亡和迁移的影响20-32
• 1 材料与方法20-24
• 2 实验结果24-30
• 3 讨论30-32
• 第三部分：FCN化合物对H1975细胞裸鼠移植瘤的影响32-39
• 1 材料与方法32-35
• 2 实验结果35-37
• 3 讨论37-39
• 全文总结39-41
• 参考文献41-43
• 文献综述43-49
• 参考文献47-49
• 致谢49-50
• 攻读术士学位期间发表的论文50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 董良;李海金;;晚期非小细胞肺癌维持治疗进展[J];中国新药与临床杂志;2015年01期

2 韩慧珍;邹庞;郭宝良;;分子靶向治疗药物的研究进展[J];中国普通外科杂志;2010年12期

3 李红艳;夏启胜;徐梅;房青;徐波;陈志华;向青;;MTT、MTS、WST-1在细胞增殖检测中最佳实验条件的研究[J];中国康复医学杂志;2005年11期

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本文编号：584366