miR-3195对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用及其机制研究

发布时间：2017-08-02 23:05

  本文关键词：miR-3195对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用及其机制研究

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【摘要】：研究目的:本实验探讨miR-3195在人喉癌Hep-2细胞中的增殖作用及机制,通过构建稳定高表达miR-3195的喉癌Hep-2细胞株,观察miR-3195高表达后对人喉癌细胞株Hep-2裸鼠移植瘤增殖能力的影响,了解喉癌中miR-3195的生物学功能,通过生物信息学分析miR-3195可能调控的靶基因,初步分析其分子机制。方法:1、应用MTT实验观察miR-3195过表达后对喉癌Hep-2细胞增殖能力的影响。2、建立裸鼠移植瘤模型裸鼠皮下注入miR-3195 5.7倍/Hep-2,psh RNA-miR/Hep-2和Hep-2三组细胞建立人喉癌异种移植瘤模型,监测三种不同细胞接种后裸鼠移植瘤的肿瘤形成及肿瘤生长情况。3、生物信息学分析对miR-3195可能的靶基因进行预测。4、Western blot验证miR-3195与其靶基因在喉癌细胞中的调控关系。结果:1、通过MTT比色法分析显示,以Hep-2组,psh RNA-miR/Hep-2及miR-3195 5.7倍/Hep-2细胞为研究对象,观察miR-3195高表达后对喉癌Hep-2增殖能力的影响,其结果表明,miR-3195 5.7倍/Hep-2组细胞增殖落后Hep-2组和psh RNA-miR/Hep-2组,表明miR-3195高表达后抑制Hep-2细胞的增殖。2、三组细胞皮下接种后在裸鼠体内均成瘤,接种psh RNA-miR/Hep-2细胞和Hep-2细胞组移植瘤较接种miR-3195 5.7倍/Hep-2细胞组移植瘤生长快。接种后30天处死裸鼠,psh RNA-miR/Hep-2细胞和Hep-2细胞组移植瘤重量明显高于miR-3195 5.7倍/Hep-2细胞组。3、靶基因预测软件预测miR-3195 3’UTR特异性靶基因,发现有4个与肿瘤相关,其中预测结果显示:miR-3195与ST3GAL23’UTR有2个结合位点,miR-3195与TBX1 3’UTR有1个结合位点。4、Western blot蛋白印记法检测miR-3195与其靶基因ST3GAL2、TBX1在喉癌细胞中的调控关系:结果表明:miR-3195 5.7倍/Hep-2组较psh RNA-miR/Hep-2细胞和Hep-2组TBX1蛋白表达量明显下降,而ST3GAL2则下降不明显,提示miR-3195抑制喉癌的增殖可能与抑制TBX1基因表达有关。结论:1、miR-3195高表达后可以抑制喉癌Hep-2细胞株的增殖。2、miR-3195高表达后可能通过下调TBX1基因的表达水平,进而抑制喉癌Hep-2细胞株的增殖。
【关键词】：喉癌 Hep-2细胞株 miR-3195 抑制增殖
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.65
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 主要中英文缩略语表9-11
• 第1章 前言11-15
• 第2章 材料和方法15-25
• 第3章 结果25-33
• 第4章 讨论33-37
• 第5章 结论37-39
• 参考文献39-43
• 综述：长链非编码RNA在喉癌中的表达及意义43-49
• 参考文献47-49
• 攻读硕士学位期间完成、发表论文情况49-51
• 致谢51

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