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PEDV S2基因的B细胞表位嵌入型S-层蛋白载体的构建及其抗原性分析

发布时间:2024-01-27 13:35
  猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)是一种可引起猪严重腹泻的猪肠道疾病,属于Ⅰ类冠状病毒。其发病主要特征是急性水样下痢、脱水和呕吐等症状,仔猪感染该病毒后具有很高的死亡率,并给养猪行业带来了巨大的经济损失。近几年来,随着分子生物学技术的飞速发展,人们对PEDV的基因结构、基因功能及致病分子机理,甚至对该病毒的检测以及预防疫苗等方面都有比较大的突破。虽然有了非常更深入的认识,但是对于全面控制PEDV的流行仍处在初步的研究阶段。本论文的研究内容及结果如下:1.本试验利用生物学软件和在线数据库中筛选出PEDV S2基因的B细胞表位,并通过Overlap PCR方法将其嵌入到嗜酸乳杆菌的S-层蛋白基因中,获得融合基因SLP-EpitopeS2。然后将融合基因SLP-EpitopeS2导入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建出了原核表达载体pGEX-SLP-EpitopeS2。2.通过PCR扩增、双酶切及基因测序结果证明融合表达载体pGEX-SLP-EpitopeS2的正确性。SDS-PAGE结果证明融合蛋白SLP-EpitopeS...

【文章页数】:50 页

【学位级别】:硕士

图1冠状病毒的结构模型图??Fig.?1?the?structure?model?picture?of?Coronavirus??

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图2?Overlap?PCR技术原理图??Fig.2?Principle?of?Overlap?PCR??注:图中SLP为S-层蛋白,B?Epitope为B细胞秦位肽基因??

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图6p6〔X一SLp一印itopeSZ里组质粒酶切鉴足与用序结果

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图7重组蛋白pGEX一SLP一Ep{topeSZ的SDS一PAGE和Westernblot鉴定结果

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本文编号:3887062

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