小黑杨PsnHB22基因的克隆及功能分析

发布时间：2024-02-26 22:30

　　HD-Zip转录因子是包含同源域(HD)和亮氨酸拉链(LZ)基序的一个植物特异性蛋白质的大家族,是一类与生长发育有关的转录因子,为高等植物所特有,在光信号转导、非生物胁迫及器官发育等生命活动中发挥重要作用。本文克隆了小黑杨PsnHB22基因,并对其进行了生物信息学分析,研究了 PsnHB22蛋白与PsnCYCD1;1蛋白的相互作用情况,以及转PsnHB22基因的烟草的生物学特性。主要结果如下:(1)小黑杨PsnHB22基因CDS序列全长为549 bp,编码一个由182个氨基酸残基组成的蛋白序列,蛋白是不含信号肽和跨膜螺旋区的不稳定亲水性蛋白,核苷酸区域内有ZF-HD-dimer结构域和homeo-ZF-HD结构域;分析系统进化树发现,PsnHB22蛋白与同属的毛果杨(Populus trichocfarpa)和不同属的小垫柳(Salix brachista)同源性较高。(2)构建pGBKT7-PsnHB22酵母表达载体,通过实验证明PsnHB22蛋白无自激活活性且对Y2Hgold菌株不存在毒性影响;通过酵母双杂交实验证明PsnHB22蛋白与PsnCYCD1;1蛋白存在相互作用,推测Ps...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１?ＰｓｎＣＦＣＺ）／：ｉ转基因小黒杨表型观察??ａ．?以转基因小黑杨植株观察；ｂ．?转基因小黑杨茎干观察??

７．０?７．０??灭菌方式?１２１?°Ｃ?２０?ｍｉｎ?１２１Ｘ２０?ｍｉｎ???保存温度?４＿＾Ｃ?４°Ｃ???２．１．５引物合成及测序??基因克垄载体构建等所用引物由北京擎科新业生物技术有限公司合成，测序工作??由北京擎科新业生物技术有限公司及吉林省库美生物科技有限公司完成。....

图２－２?基因的克隆及鉴定??．．．．．－－??

?２小黑杨ＰｓｎＨＢ２２基因的克隆及生物信息学分析???２．３结果分析??２．３．１小黑杨基因的克隆??提取小黑杨叶片总ＲＮＡ，并将其反转录后的ｃＤＮＡ作为模板，进行目的基因的扩??增，经电泳检测，目的条带大小与预期大小一致（图２－２?Ａ）。胶回收目的条带后与??ｐＥＡＳＹ－Ｔｌ....

图２－３小黑杨基因ｅＤＮＡ序列及氨基酸序列??

ＡＧＧ?ＴＴＴ?ＴＧＴ?ＧＡＡ?ＧＧＡ?ＡＴＴ?ＧＧＧ?ＧＴＴ??１３６?ＤＥＥＤＥＶＥＲＦＣＥＧＩＧＶ??４５１?ＡＧＣ?ＡＧＡＣＡＧ?ＧＴＴＴＴＴＡＡＡＧＴＴＴＧＧ?ＡＴＯ?ＣＡＴＡＡＴＣＡＴＡＡＧ?ＡＡＴＴＣＴ??１５１?Ｓ?Ｒ?Ｑ?Ｖ?Ｆ?Ｋ?Ｖ?Ｗ?Ｍ?Ｈ?Ｎ?Ｈ?Ｋ?....

图２－９?ＨＢ２２蛋白系统进化树分析??２．４本章小结??

２小黑杨ＰｓｎＨＢ２２基因的克隆及生物信息学分析???２．３．２．３小黑杨ＰｓｎＨＢ２２蛋白保守结构域分析??利用ＮＣＢＩ中的程序ＣＤ－Ｓｅａｒｃｈ预测小黑杨ＰｓｎＨＢ２２蛋白保守结构域，结果表明在??第２５－１７４核苷酸区域内含有ＺＦ－ＨＤ－ｄｉｍｅｒ结构域，第３１６－４８９核....

本文编号：3911951