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拟南芥SRR基因调控根发育的研究

发布时间:2024-03-11 06:07
  在真核生物中,蛋白质的N末端乙酰化修饰是一种非常普遍的蛋白修饰类型。蛋白质组学的研究结果结合生物信息学的预测表明,在低等真核生物酿酒酵母中50%-70%的蛋白发生Nt乙酰化修饰,模式植物拟南芥中70%-75%的蛋白发生Nt乙酰化修饰,体外培养的人细胞中70%-90%的蛋白发生Nt乙酰化修饰。蛋白质的Nt乙酰化修饰是由一系列进化保守的N末端乙酰转移酶复合体(N-terminal acetyltransferases complex,Nats)催化完成的,Nats以乙酰辅酶A作为乙酰基团的供体,催化蛋白质第一个氨基酸残基的α氨基产生乙酰化修饰,这种修饰不但使蛋白质的分子量增加了42 Da,同时屏蔽了蛋白质N末端氨基所带的正电荷。蛋白质Nt乙酰化修饰主要是共翻译修饰的过程,大部分Nats与核糖体锚定在一起,当蛋白质刚刚被翻译出20-50个氨基酸的新生多肽时,Nats催化完成Nt乙酰化修饰。与蛋白质赖氨酸的乙酰化修饰不同,Nt乙酰化是不可逆的修饰过程。乙酰辅酶A是生物体内重要的代谢物,Nats通过催化蛋白Nt乙酰化修饰将体内代谢状态与蛋白功能调控联系起来,增加了生命活动调控的精度和广度。在真核...

【文章页数】:55 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1-1真核生物中N末端乙酰转移酶类型[132]

图1-1真核生物中N末端乙酰转移酶类型[132]

山西师范大学硕士学位论文6Nats有更多的底物类型,真核生物后来通过基因复制,进化出特异的N末端乙酰转移酶,而辅助亚基可能会影响蛋白底物的特异性,并且负责将Nats锚定到核糖体上。图1-1真核生物中N末端乙酰转移酶类型[132]NatA-NatE对底物蛋白进行共翻译修饰,而Nat....


图3-2SRR基因结构和T-DNA插入位点示意图

图3-2SRR基因结构和T-DNA插入位点示意图

结果与分析253结果与分析3.1SRR基因突变体的鉴定为了探究拟南芥中N末端乙酰转移酶的功能,我们从ABRC拟南芥突变体库中购买到多个N末端乙酰转移酶基因的突变体,并对突变体进行了DNA水平的鉴定和初步的表型观察,我们发现其中一个纯合突变体表现为主根变短的表型,我们将其命名为SR....


图3-3srr-1突变体DNA水平的鉴定

图3-3srr-1突变体DNA水平的鉴定

结果与分析253结果与分析3.1SRR基因突变体的鉴定为了探究拟南芥中N末端乙酰转移酶的功能,我们从ABRC拟南芥突变体库中购买到多个N末端乙酰转移酶基因的突变体,并对突变体进行了DNA水平的鉴定和初步的表型观察,我们发现其中一个纯合突变体表现为主根变短的表型,我们将其命名为SR....


图3-4RT-PCR鉴定srr-1突变体中SRR基因的转录本水平

图3-4RT-PCR鉴定srr-1突变体中SRR基因的转录本水平

山西师范大学硕士学位论文26我们对srr-1突变体进行了RNA水平的鉴定,以检测突变体中SRR基因的转录本情况。通过提取野生型和srr-1突变体生长7d的幼苗的RNA,对RNA进行反转录,合成cDNA,然后以cDNA为模板,以FP+RP引物对进行扩增。我们观察到在野生型的cDNA....



本文编号:3925938

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