芝麻肌醇半乳糖苷合成酶基因SiGolS6的克隆及功能分析

发布时间：2024-03-17 20:32

　　【目的】SiGolS6是芝麻肌醇半乳糖苷合成酶家族成员,在植物抗旱过程中可能发挥重要作用。研究SiGolS6在植物干旱胁迫抗性中的功能,以期为芝麻抗旱遗传改良提供理论基础和基因资源。【方法】利用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法从芝麻中克隆获得肌醇半乳糖苷合成酶基因SiGolS6。使用InterProScan、ClustalX2和MEGA5.2等生物信息学软件对序列进行分析。通过对转SiGolS6拟南芥材料的表型分析和生理指标测定,研究SiGolS6在植物抗旱性中的功能及作用机理。【结果】克隆获得SiGolS6的全长CDS序列为921 bp,编码306个氨基酸,其蛋白质分子量为35.07 kD,等电点为4.75。序列分析显示SiGolS6蛋白含有糖基转移酶保守结构域(IPR002495),属于糖基转移酶超家族。与其他物种GolS蛋白构建的系统进化树中,SiGolS6与马铃薯中的同源基因相似度较高。利用潮霉素筛选和PCR鉴定,获得6个独立的转基因拟南芥株系;qRT-PCR分析筛选出表达量较高的3个转基因株系(OE-2、OE-3和OE-4)...

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【部分图文】：

图3转基因株系中棉子糖含量检测

图2转基因拟南芥的获得和鉴定3讨论

图2转基因拟南芥的获得和鉴定

图1SiGolS6和其他物种GolS的多序列比对（A）和系统进化分析（B)图3转基因株系中棉子糖含量检测

图4转基因拟南芥耐旱性鉴定

植物在正常条件下RFOs含量很少，但在逆境胁迫下，RFOs的积累会被诱导，从而增强植株的抗逆性[7-8,32]。GolS是催化RFOs合成的关键酶[3]，其活性会影响RFOs的积累水平[33]。检测转基因和野生型植株的棉子糖含量发现，转基因拟南芥的棉子糖含量显著高于野生型植株，说....

图4转基因拟南芥耐旱性鉴定

图4转基因拟南芥耐旱性鉴定图5转基因拟南芥氧化相关生理指标测定

本文编号：3931594