水稻Xa7候选基因分析与功能验证

发布时间：2024-03-30 17:31

　　水稻Xa7基因是一个具有高抗、广谱持久抗性的抗白叶枯病基因。对水稻抗病基因Xa7展开克隆研究,不仅能够丰富关于植物抗病分子机制相关的理论知识,同时也给与抗病分子育种提供了一个新的抗源。在前期的研究中,本实验室利用镇恢084与成恢448杂交构建群体进行图位克隆,结合对IRBB7和IR24的BAC文库测序将Xa7基因精细定在约120kb区间内。但是由于定位区间内基因组序列与常规水稻存在很大差异,无法利用F2代群体的染色体交换对Xa7进行进一步精细定位。本研究通过对镇恢084进行辐射诱变,在10000个M1株系中,筛选得到3个高度感病突变体。利用PCR对定位区间进行扩增,筛选到一个Xa7定位区间染色体发生大片段缺失的突变体ZM2。遗传分析表明镇恢084与ZM2杂交F1抗病,F2群体抗感分离比为3:1,感病表型与缺失位点紧密连锁。日本晴与ZM2杂交F1感病,F2群体全部感病。通过对感病突变体基因组的高通量测序比对分析,在Xa7定位区间染色体缺失了大小为106kb片段,与之前定位的120kb有25kb的重叠区,最终将Xa7定为位在25kb的区间内。通过生物信息学分析,在这25kb区间内发现有2个...

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１植物对细菌抗性进化模型??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ?ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｐｌａｎｔ?ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｔｏ?ｂａｃｔｅｒｉａ??

．．病原菌抑制植物的防御反应主要是通过分泌些与植物防ＴＩ反应相关的蛋??白质。往往在植物的防御反应被抑制的同吋，病原菌的毒性也得到很大的提高。??黄单胞杆菌具有多种分泌机制，而其中的ＩＩＩ型分泌系统（Ｔ３Ｓ）勹其致病性是最??紧密相关的。??ＩＩＩ型分泌系统是一种由Ｈｒｐ基因簇编....

图1.2avrBs3家族的结构lulFig.1.2ConstructiveofavrBs3familyprotein

目前已经克隆的ＴＡＬ效应因子有：ＡｖｒＸａ２７、ＰｔｈＸｏｌ、ＰｔｈＸｏ３、ＡｖｒＸａ３、??八￥１＾５、八丫以３７、八丫以３１０、卩仆＼〇６』出乂〇７和八￥＾３２３。丁八［效应因子卩仆＼〇１??和ＰｔｈＸｏ３以及ＡｖｒＸａ７这３种效应因子可以诱导ＭｔＮ３／ｓａｌｉｖａ／ＳＷＥＥ....

图２．１感病突变体接菌验证??Ｆｉｇ．?２．１?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ?ｍｕｔａｎｔｓ??

３．２利用ＰＣＲ方法筛选定位区间染色体发生缺失的突变体??利用实验室自主开发的分子标记，对抗感分离植株（ＺＭ２、ＺＭ４、ＺＭ５）进??行办７连锁分子标记分析（如图２．２）。经过人量的分子标记验证，发现当在??定位区间内分子标记ＳＭ２０对ＺＭ２、ＺＭ４、ＺＭ５感病突变体进行鉴定分析....

图2.3感病突变体ZM2的遗传分析

晴为父本进行杂交获得Ｆｉ，并对其进行繁殖，获得Ｆ２。在金华对ＦｊＰＦ２植，在分蘖期对群体进行接菌，调查发现镇恢０８４与ＺＭ２杂交Ｆ１抗体抗感分离比为３：１，感病表型与缺失位点紧密连锁。日本晴与ＺＭ２病，Ｆ２群体全部感病。进一步验证了?ＺＭ２感病突变体的突变是由染色成的。??因此在....

本文编号：3942698