矮牵牛PhUGT74E1和PhUGT74E2基因克隆与表达分析

发布时间：2024-04-08 20:51

　　矮牵牛(Petunia hybrida Var.Mitchel diploid)为茄科碧冬茄属,由于花色丰富、花期长、栽培容易,是园林应用中重要的观赏植物。矮牵牛分枝发育及抗逆性均是目前研究的热点。本研究以矮牵牛为试验材料,克隆了矮牵牛糖基转移酶PhUGT74和PhUGT74E2基因,对其序列进行了生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR对PhUGT74E1、PhUGT74E2基因在不同组织、以及干旱及盐胁迫处理下的表达进行了分析;构建了 PhUGT74E1、PhUGT74E2过表达载体以及PhUGT74E2启动子(pPhUGT74E2)融合GUS的表达载体,侵染拟南芥获得35S::PhUGT74E2过表达转基因植株。主要结果如下:(1)克隆获得矮牵牛糖基转移酶PhUGT74E1、PhUGT74E2基因。PhUGT74E1含有一个1401 bp的开放阅读框,编码466个氨基酸。该蛋白分子量和等电点分别为52.73 kDa和5.42。推测其蛋白分子式为C2374H3715N609O700S23,进化树分析矮牵牛UGT74E1蛋白与马铃薯UGT74E1蛋白亲缘关系最近;PhUGT74E2含...

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致谢
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 抗旱、耐盐研究进展
        1.1.1 抗旱研究进展
        1.1.2 耐盐研究进展
    1.2 分枝发育研究进展
        1.2.1 分枝的类型
        1.2.2 影响分枝的因素
    1.3 生长素糖基转移酶研究进展
    1.4 国内外矮牵牛分枝发育的研究进展
    1.5 UGT74E1、UGT74E2基因的研究进展
第二章 引言
    2.1 研究目的与意义
    2.2 研究内容
    2.3 技术路线
第三章 材料与方法
    3.1 材料
        3.1.1 试验材料及菌株、质粒和感受态
    3.2 试验仪器与试剂
        3.2.1 试验仪器
        3.2.2 试验试剂
        3.2.3 常用溶液配方
        3.2.4 根癌农杆菌ASE感受态制作
        3.2.5 本试验引物
    3.3 试验方法
        3.3.1 PhUGT74E1、PhUGT74E2基因的克隆
        3.3.2 PhUGT74E1、PhUGT74E2基因以及启动子的生物信息学分析
        3.3.3 PhUGT74E1、PhUGT74E2基因的表达分析
        3.3.4 PhUGT74E1基因过表达载体的构建
        3.3.5 PhUGT74E2基因过表达载体的构建
        3.3.6 PhUGT74E2基因融合GUS表达载体的构建
        3.3.7 拟南芥花序浸染与阳性植株鉴定
第四章 结果与分析
    4.1 PhUGT74E1基因的克隆与生物信息学分析
    4.2 PhUGT74E2基因的克隆与生物信息学分析
    4.3 PhUGT74E2基因的启动子克隆与生物信息学分析
    4.4 PhUGT74E1、PhUGT74E2基因的表达分析
        4.4.1 PhUGT74E1基因的特异性表达分析
        4.4.2 PhUGT74E2基因的特异性表达分析
        4.4.3 干旱及盐胁迫下PhUGT74E2的表达量分析
    4.5 PhUGT74E1基因过表达载体的构建
    4.6 PhUGT74E2基因过表达载体的构建
    4.7 PhUGT74E2基因融合GUS载体的构建
第五章 讨论
第六章 结论
参考文献
作者简介



本文编号：3948796