自噬表型分析平台开发与数据库构建

发布时间：2024-03-04 02:22

　　细胞自噬是真核生物中高度保守的对细胞内物质进行周转的重要过程,细胞通过动态调控自噬相关蛋白及翻译后修饰来维持各种物质/细胞器在合成、降解和重新利用之间的代谢平衡。细胞自噬作为维持细胞稳态的重要生物过程,受到上游多个生物学过程的调控,例如细胞自噬逐渐被认为受到生物钟和营养信号的双重调控而表现出昼夜节律的周期性振荡,保证机体的代谢活性与外界环境变化及摄食周期协调一致。自噬过程缺陷和生物钟紊乱均被证明与健康长寿、神经退行性疾病和癌症的发生发展过程密切相关,表明昼夜节律的细胞自噬可能对细胞定期清除受损的物质和细胞器、维持机体的健康生理状态发挥着重要作用。近年来,从正向遗传学鉴定表型变化到反向遗传学深入研究分子组分,为深刻理解细胞自噬和昼夜节律的调控机制提供了大量的实验数据和理论基础,尤其是近几年高通量技术的快速发展促进了大规模鉴定转录层面和翻译后修饰层面的调控信息。如何收集整理这些数据对细胞自噬与昼夜节律的调控关系进行系统分析和建立快速有效的自噬功能筛选平台是该领域亟需解决的问题。因此,本文基于荧光显微镜观测方法开发了自噬表型预测工具,并对细胞自噬和昼夜节律基因进行了系统的整合和生物信息学研究...

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【部分图文】：

图1.1.1自噬研究的增长和重大历史事件[1]

图1.1.1自噬研究的增长和重大历史事件[1]。Figure1.1.1Thegrowthofautophagyresearchandhistoricallandmarks[1].当前研究发现，在正常生理条件下，细胞始终保持着较低的基础自噬水平，于清除胞内过量....

图1.1.2酿酒酵母细胞自噬概览

华中科技大学博士学位论文在选择性自噬过程中，目前研究较多的主要包括Cvt途径、线粒体自噬、内质自噬、过氧化物酶体自噬、核糖体自噬和脂类自噬等（图1.1.2）（表1.1.1）。与他降解性自噬途径不同，Cvt途径是一种酶合成的选择性自噬，氨肽酶1Am....

图1.2.1巨自噬不同发生阶段的检测方法

华中科技大学博士学位论文度磷酸化而处于失活状态，一旦自噬被诱导，Atg13会迅速发生去因此通过免疫印迹检测Atg13的磷酸化状态可以作为判断自噬是，同时Atg1的激酶活性也可辅助检测自噬状态[21]。鉴于Atg8在幅度诱导表达，检测Atg8....

图1.2.2PHO8Δ60分析方法检测自噬发生水平的原理

过氧化物酶体自噬过程。对于Cvt途径，鉴于preA泡后通过蛋白酶水解掉N端才会变为成熟的mApe量相差11kD，因此通过免疫印迹检测preApe1和m径的进展是否顺利[21]。发展了一种能定量检测非选择性自噬发生水平的方过将碱性磷酸酶PHO8基因N端....

本文编号：3918741