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过表达及抑制表达AS基因对杨树生长及生理的影响

发布时间:2021-02-08 15:57
  天冬酰胺合成酶(Asparagine synthetase,AS)作为初级氮素同化过程关键酶之一,其产物天冬酰胺是植物氮素运输的主要载体。本研究通过对过表达PnAS1的84K杨(Populus alba×Populus glandulosa)转基因植株,采用qRT-PCR筛选出2个在地上部分及根组织中均高表达的试验材料。不同供氮水平下,测定了过表达PnAS1 84K杨植株及野生型WT的生长指标及氮代谢相关的生理生化指标。构建AS1基因的RNAi植物抑制表达载体并获得了抑制表达AS1基因的84K杨转基因株系。此外,通过对杨树基因组的搜索,鉴定出与天冬氨酸代谢密切相关的9个天冬氨酸转氨酶(其催化产物天冬氨酸,是天冬酰胺合成的唯一受体)家族基因并对其进行生物信息学简要分析,主要研究结果如下:(1)从杨树基因组中鉴定了 9个天冬氨酸转氨酶家族基因(PtASPAT),其中7个真核型 ASPAT基因(PtASPAT1~PtSPAT7)及 2 个原核型 ASPAT基因(PtASPAT8~PtASPAT9)。采用实时荧光定量PCR技术对9个PtASPAT家族基因表达水平检测。结果显示PtASPAT在根... 

【文章来源】:东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

过表达及抑制表达AS基因对杨树生长及生理的影响


图2-2杨树家族基因结构??MEME工PtASPAT白

过表达及抑制表达AS基因对杨树生长及生理的影响


图2-3,由图可知,PtASPAT??

氨基酸序列,基因,杨树,真核


2.4小结与讨论??ASPAT作为催化谷氨酸生成天冬氨酸的重要转氨酶,其产物天冬氨酸是天冬酰胺合??成的唯一受体。本研宄从杨树基因组中鉴定天冬氨酸转氨酶(Aspartate??aminotransferase,ASPAT)家族基因(P/乂通过生物信息学分析其基因家族的功??能及表达特性,为研宄ASPAT在杨树初级氮素同化过程中行使的功能提供重要的参考??依据。以模式植物拟南芥ASPAT为探针,在杨树基因组中筛选并鉴定9个乂家族??基因,其中7个真核型基因(/^5烈77?P/ASPdTV)和2个原核型ASiMr基因??(尸见4F9)。采用相邻连接法(Neighbor-Joining,?NJ)构建拟南芥与杨树??ASPAT蛋白家族的系统进化树,结果显示杨树7个原核型ASPAT蛋白被分为I类,2个??真核型ASPAT被分为II类;??采用生物信息学方法对杨树家族基因的理化性质及氨基酸序列进行预测,结??果表明:9种杨树基因编码区长度为1215?1791?bp,编码的氨基酸304?480??个,外显子7?12个;等电点为5.66?8.99,相对分子质量为33.11?53.31KD,脂融指??数在76.36?93.54之间;除PtASPAT6和PtASPAT7为不稳定蛋白,其它PtASPAT蛋白??

【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3024172

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