椰扁甲啮小蜂卵期寄生因子特性及其对寄主水椰八角铁甲蛹的免疫抑制作用

发布时间：2023-11-10 19:53

　　椰扁甲啮小蜂Tebrastichus brontispae(Ferriere)属小蜂总科姬小蜂科Eulophidae,可用于防治我国南方重大入侵害虫水椰八角铁甲Octodonta nipae Maulik。但关于椰扁甲啮小蜂对寄主水椰八角铁甲蛹的免疫调控机制还不明确。因此,本文从椰扁甲啮小蜂寄生因子的毒性及水椰八角铁甲蛹的免疫抵抗能力两方面,分析了椰扁甲啮小蜂与寄主水椰八角铁甲蛹的免疫互作机制。主要研究结果如下:1)明确了椰扁甲啮小蜂卵表面寄生因子的种类及其在蜂卵抵抗寄主免疫中的作用对椰扁甲啮小蜂卵期寄生因子的透射电镜和扫描电镜观察发现,该蜂不含多分 DNA 病毒(polydnavirus,PDV)和类病毒纤丝(virus-like filaments,VLF)。间接免疫荧光和免疫印迹实验观察发现椰扁甲啮小蜂卵表面可能存在一种对蜂卵起保护,可被蜗牛凝集素(Helix pomatia lectin)结合的蛋白。利用H.pomatia lectin结合蛋白血黏素Hemomucin的简并引物扩增得到类脂细胞膜相关蛋白序列。类脂细胞膜相关蛋白抗体孵育初产蜂卵后,寄主水椰八角铁甲蛹对寄生蜂蜂卵的...

【文章页数】：154 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
1 引言
    1.1 寄生蜂的卵期主要免疫抑制因子
        1.1.1 毒液
        1.1.2 多分DNA病毒
        1.1.3 卵巢蛋白等其它卵期免疫抑制因子
    1.2 寄生蜂寄生后对寄主的免疫调控作用
        1.2.1 寄生蜂逃避寄主免疫的策略-局部免疫
        1.2.2 寄生蜂主动抑制寄主免疫的策略-系统免疫
    1.3 本研究的目的及意义
2 椰扁甲啮小蜂卵表面的保护因子特性及其效能
    2.1 材料与方法
        2.1.1 供试虫源
        2.1.2 试验仪器与试剂
        2.1.3 椰扁甲啮小蜂卵巢内PDV的确定
        2.1.4 椰扁甲啮小蜂蜂卵表保护因子种类
        2.1.5 椰扁甲啮小蜂卵表面糖蛋白种类的鉴定
        2.1.6 卵表保护蛋白-类脂细胞膜相关蛋白全长基因的获得
        2.1.7 类脂细胞膜相关蛋白在不同时期的寄生蜂内表达分布
        2.1.8 卵表潜在保护蛋白-类脂细胞膜相关蛋白在的免疫效能分析
        2.1.9 数据分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 椰扁甲啮小蜂卵巢PDV鉴定
        2.2.2 椰扁甲啮小蜂初产卵寄生因子生化特性分析
        2.2.3 类脂细胞膜相关蛋白对寄主包囊蜂卵的抵御作用
    2.3 讨论
3 椰扁甲啮小蜂毒器官结构及其毒液蛋白组分分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 主要试验仪器与试剂
        3.1.2 椰扁甲啮小蜂毒器官外部形态及超微结构观察
        3.1.3 椰扁甲啮小蜂毒器官形态结构的发育及蛋白含量的变化
        3.1.4 毒液蛋白组成及定量分析
        3.1.5 数据分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 椰扁甲啮小蜂毒液器官的形态及结构组成
        3.2.2 椰扁甲啮小蜂毒器官形态结构的发育及蛋白含量的变化
        3.2.3 毒液蛋白组成分析
    3.3 讨论
4 椰扁甲啮小蜂寄生及毒液与卵巢液对寄主水椰八角铁甲蛹的免疫抑制作用
    4.1 材料与方法
        4.1.1 主要试剂配制
        4.1.2 水椰八角铁甲蛹血细胞类型的鉴定
        4.1.3 水椰八角铁甲蛹主要免疫血细胞类型鉴定
        4.1.4 椰扁甲啮小蜂毒液和卵巢液的制备
        4.1.5 椰扁甲啮小蜂寄生及毒液与卵巢液对寄主水椰八角铁甲蛹血细胞免疫的影响
        4.1.6 椰扁甲啮小蜂寄生及毒液与卵巢液对水椰八角铁甲蛹体液免疫的影响
        4.1.7 数据分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 水椰八角铁甲蛹的血细胞及免疫血细胞类型
        4.2.2 椰扁甲啮小蜂寄生及毒液与卵巢液对寄主水椰八角铁甲蛹的细胞免疫响应
        4.2.3 椰扁甲啮小蜂寄生及毒液与卵巢液对寄主水椰八角铁甲蛹体液免疫影响
    4.3 讨论
        4.3.1 水椰八角铁甲蛹体内的血细胞及免疫血细胞类型
        4.3.2 椰扁甲啮小蜂寄生及毒液与卵巢液对寄主水椰八角铁甲蛹细胞免疫的影响
        4.3.3 椰扁甲啮小蜂寄生及毒液与卵巢液对寄主水椰八角铁甲蛹体液免疫的影响
5 总结与展望
    5.1 总结
        5.1.1 椰扁甲啮小蜂卵表面的寄生因子种类
        5.1.2 椰扁甲啮小蜂寄生对寄主水椰八角铁甲蛹细胞及体液免疫的影响
    5.2 本研究创新之处
    5.3 展望
主要参考文献
攻读学位期间的学术论文与参会情况
致谢



本文编号：3862206