迟缓爱德华菌菌蜕疫苗对罗非鱼的免疫保护效果研究

发布时间：2023-11-26 14:36

　　迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda)是危害水产养殖业的重要病原菌,该菌引起的疾病在世界海水、淡水养殖动物中普遍流行,带来严重的经济损失。目前消毒剂、抗生素等仍是预防和治疗爱德华菌病的主要方法,但存在细菌耐药性、食品药物残留等问题。细菌菌蜕是通过调控噬菌体Phi X174的裂解基因E在革兰氏阴性菌中的表达而形成的无细胞浆和繁殖能力的细菌空壳,没有活菌的致病作用,同时菌蜕包含的LPS、类脂、肽聚糖等天然的免疫刺激复合物,具有天然的佐剂性质,能诱导更强的免疫反应,也符合环境无污染、水产食品无药物残留等优点,因此菌蜕疫苗是比常规疫苗更理想的新型疫苗体系。为了研究迟缓爱德华菌菌蜕疫苗对罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫保护效果,本试验首先利用构建的裂解质粒载体通过高温诱导制备了迟缓爱德华菌菌蜕疫苗,利用腹腔注射、口服两种途径免疫罗非鱼,定期采集血清、头肾、脾脏,分别检测了血清抗体水平,血清中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)三种酶活性和头肾、脾脏中IL-1、IFN、TNF、Caspase3的相对表达量;并通过攻毒试验计算了菌...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
符号说明
中文摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 迟缓爱德华菌研究进展
        1.1.1 迟缓爱德华菌病原学
        1.1.2 迟缓爱德华菌病流行病学
        1.1.3 迟缓爱德华菌病临床症状病理组织学变化
        1.1.4 迟缓爱德华菌病的防控
    1.2 罗非鱼养殖概况
    1.3 鱼类免疫系统
        1.3.1 鱼类的免疫器官
        1.3.2 鱼类的免疫细胞
        1.3.3 鱼类的免疫球蛋白
        1.3.4 鱼类的细胞因子
    1.4 影响鱼类免疫的主要因素
    1.5 鱼类疫苗的接种途径
    1.6 菌蜕疫苗研究现状
        1.6.1 菌蜕疫苗
        1.6.2 菌蜕疫苗的优点
        1.6.3 菌蜕作为抗原载体
    1.7 荧光定量技术
        1.7.1 荧光定量技术的分类
        1.7.2 实时荧光定量PCR的定量方法
        1.7.3 荧光定量技术的应用
        1.7.4 荧光定量技术的优点
    1.8 研究背景
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 菌株，载体
        2.1.2 实验试剂及耗材
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 实验所用溶液及其配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 疫苗制备
        2.2.2 疫苗对罗非鱼的免疫实验
3 结果与分析
    3.1 PCR检测结果
    3.2 溶菌动力学
    3.3 裂解效率
    3.4 攻毒剂量的确定
    3.5 ELISA最佳工作浓度
    3.6 抗体水平测定
    3.7 酶活力测定结果
    3.8 荧光定量测定结果
    3.9 相对免疫保护率结果
4 讨论
    4.1 疫苗免疫对罗非鱼抗体水平的影响
    4.2 疫苗免疫对罗非鱼血清中酶活力的影响
    4.3 疫苗免疫对罗非鱼免疫相关基因的影响
    4.4 疫苗免疫对罗非鱼的免疫保护率
5 结论
参考文献
致谢
研究生期间发表论文



本文编号：3867971