Akkermansia muciniphila来源糖核苷酸合成相关酶性质研究及应用探究
发布时间：2021-11-25 19:44
多糖及糖缀合物广泛存在于自然界中,参与多种重要的生理和病理过程,研究糖类分子的结构对于分析其作用机制具有重要意义。因此糖类分子的合成是目前糖生物学研究的重中之重,而糖类分子的合成需要以糖核苷酸为糖基供体。合成糖核苷酸最简便的途径是补救合成途径,即单糖在单糖激酶催化下合成糖-1-磷酸,然后在相应的糖焦磷酸化酶的催化下进行糖核苷酸的合成。而单糖激酶和糖焦磷酸化酶的底物适应性有限,亟待发现更多具有广泛地底物适应性的酶。本论文主要分为两个部分:一是对嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila ATCC BAA-835）来源的糖核苷酸合成相关酶的酶学性质进行研究,并利用一锅法合成了几种糖核苷酸;二是在合成ManNAc-1-P的基础上,对于UDP-ManNAc的简便合成途径进行探究。半乳糖激酶（Galactokinase,GalK）能够催化半乳糖及其他单糖的磷酸化,为糖核苷酸的合成提供底物。为发现具有广泛的底物适应性的半乳糖激酶,在第二章中,我们首先表达纯化了嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila ATCC BAA-835）来源的半乳糖激酶（Ga...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：116 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２哺乳动物细胞中常见的糖基化类型１１６１??Ｎ－ｇｌｙｃａｎｓ，?Ｎ－聚糖；０－ｇｌｙｃａｎｓ，０－聚糖；Ｈｅｐａｔａｎ?ｓｕｌｆａｔｅ，硫酸乙酷肝素；ＧＡＧ，糖胺聚糖；??
Ｐ－Ｇｔ｜ｐｇｌｌ?Ｐｇ？＾＾／?＾??ｃｙｔｏｐｌａｓｍ?—Ｄ／Ｅ．Ｘ，．Ｎ．ＸｒＳ／Ｔ＾?ｊ?Ｇｌｕｃｏｓｅ?ｕｐｔａｋｅ?ａｎｄ??［??？?＿?＿?？???Ｎ－ｈｎｋｅｄ?ｊ（????????ｍｅｔａｂｏｈｓｍ???—???ｊ??丨?ｆ?＜ｄ＞ｓ＝厂ｃ?ＩＩ?Ｍ??■?ｈＮ＾ｈ＿＾？）?？「、鲁??！ＥＦＰ?？?ｒ?ｉ??Ｌ?…—????Ｃｕｒｒｅｎｔ?Ｏｐｉｎｉｏｎ?ｍ?Ｃｈｏｍｃａ）?Ｂｉｏｌｏｇｙ??图１－３细菌内Ｎ－糖基化途径［３２】??ａ．空肠弯曲杆菌的蛋白Ｎ－糖基化途径；ｂ．大肠杆菌（ＮｌｅＢ）和沙门氏菌（ＳｓｅＫ）三型??分泌系统；ｃ．?ＥａｒＰＧＴａｓｅ激活ＥＦ－Ｐ示意图；ｄ．流感嗜血杆菌胞质ＨＭＷ１Ｃ糖基转移系??统；１＾？－（１沉八〇８３（：，１；０？－２，４－二乙酰胺基杆菌胺（１１０？－２，４－二乙酰胺基－２，４，６－三苯氧基??－ａ－Ｄ－葡萄糖）；ＧａｌＮＡｃ，?Ｎ－乙酰半乳糖胺；ＧｌｃＮＡｃ，Ｎ－乙酰氨基葡糖；Ｐ，磷酸盐；ＵＤＰ，??尿苗二憐酸；Ｒｈａｍｎｏｓｅ，鼠李糖；ＴＤＰ，胸苗二鱗酸??在许多细菌［３３］和古细菌［３４］中也发现了?Ｎ－糖基化，以种种方式完成糖链的延??伸（如图１－３）。ａ）批量转移，以空肠弯曲杆菌为例细菌Ｎ－连接蛋白糖基化系统??的原型。通过添加核苷酸激活的糖基供体，将十一碳烯基焦磷酸连接的七糖组装??在胞质溶胶中。完整的七糖通过糖基转移酶Ｋ?（ＰｇｌＫ）穿过内膜进入周质并识别??４??
山东大学硕士学位论文??因组序列的阐明和功能基因组学研宄的不断深入，越来越多的来自不同物种的??ＧＴｓ性质被研宄并应用到糖链的合成中。…锅酶法利用ＧＴｓ和糖核苷酸生物合成??酶的组合为天然存在和非天然碳水化合物（包括结构复杂的碳水化合物）提供了??简便的合成途径＾＃６４１。??１．２糖核苷酸概述??１．２．１糖核苷酸的分类及其生物学作用??糖核苷酸作为糖基化作用的糖基供体｜６５］，是单糖的活化形式，也是糖缀合物??生物合成中所必不可少的。其不仅是脱氧糖、氨基脱氧糖、链支链糖和糖醛酸的??合成前体，也是大多数动植物中合成维生素Ｃ的起始材料［６６］。它们由活化的糖??基供体组成，通过糖基转移酶催化将糖残基转移到各种糖基化受体上［６７］，生成糖??苷、寡糖或多糖［６８’６９］。糖核苷酸具有发展成为研宄糖缀合物生物合成及治疗干预??策略中工具的潜力？１。??ＯＨ?〇Ｈ?ＯＨ?ＯＨ?ＯＨ??〇Ｈ?〇ＵＤＰ?〇Ｈ?〇ＵＤＰ?ＡｃＨＮ?〇ＵＤＰ??ＵＤＰ－Ｄ－ＧＩｃ?ＵＤＰ－Ｄ－Ｇａｌ?ＵＤＰ－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ??〈〇Ｈ?ＯＨ??ＡｃＨＮ?〇ＵＤＰ?ＨＯ?ＯＵＤＰ?＼?Ｉ??ＯＨ?ＯＵＤＰ??ＵＤＰ－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ?ＵＤＰ－Ｄ－Ｘｙｌ?ＵＤＰ－Ｄ－ＧｌｃＡ??〇Ｈ?ＯＨ??ＯＨ?ＯＧＤＰ?ＨＯ’??ＧＤＰ－Ｌ－Ｆｕｃ?ＧＤＰ－ＩＶＩａｎ?ＣＭＰ－Ｓｉａ??图１－４常见的哺乳动物和细菌糖核苷酸??６??
本文编号：3518674
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：116 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２哺乳动物细胞中常见的糖基化类型１１６１??Ｎ－ｇｌｙｃａｎｓ，?Ｎ－聚糖；０－ｇｌｙｃａｎｓ，０－聚糖；Ｈｅｐａｔａｎ?ｓｕｌｆａｔｅ，硫酸乙酷肝素；ＧＡＧ，糖胺聚糖；??
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山东大学硕士学位论文??因组序列的阐明和功能基因组学研宄的不断深入，越来越多的来自不同物种的??ＧＴｓ性质被研宄并应用到糖链的合成中。…锅酶法利用ＧＴｓ和糖核苷酸生物合成??酶的组合为天然存在和非天然碳水化合物（包括结构复杂的碳水化合物）提供了??简便的合成途径＾＃６４１。??１．２糖核苷酸概述??１．２．１糖核苷酸的分类及其生物学作用??糖核苷酸作为糖基化作用的糖基供体｜６５］，是单糖的活化形式，也是糖缀合物??生物合成中所必不可少的。其不仅是脱氧糖、氨基脱氧糖、链支链糖和糖醛酸的??合成前体，也是大多数动植物中合成维生素Ｃ的起始材料［６６］。它们由活化的糖??基供体组成，通过糖基转移酶催化将糖残基转移到各种糖基化受体上［６７］，生成糖??苷、寡糖或多糖［６８’６９］。糖核苷酸具有发展成为研宄糖缀合物生物合成及治疗干预??策略中工具的潜力？１。??ＯＨ?〇Ｈ?ＯＨ?ＯＨ?ＯＨ??〇Ｈ?〇ＵＤＰ?〇Ｈ?〇ＵＤＰ?ＡｃＨＮ?〇ＵＤＰ??ＵＤＰ－Ｄ－ＧＩｃ?ＵＤＰ－Ｄ－Ｇａｌ?ＵＤＰ－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ??〈〇Ｈ?ＯＨ??ＡｃＨＮ?〇ＵＤＰ?ＨＯ?ＯＵＤＰ?＼?Ｉ??ＯＨ?ＯＵＤＰ??ＵＤＰ－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ?ＵＤＰ－Ｄ－Ｘｙｌ?ＵＤＰ－Ｄ－ＧｌｃＡ??〇Ｈ?ＯＨ??ＯＨ?ＯＧＤＰ?ＨＯ’??ＧＤＰ－Ｌ－Ｆｕｃ?ＧＤＰ－ＩＶＩａｎ?ＣＭＰ－Ｓｉａ??图１－４常见的哺乳动物和细菌糖核苷酸??６??
本文编号：3518674
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