嗜热四膜虫胱硫醚-γ-裂解酶Cgl1的表达、定位及功能分析

发布时间：2021-12-18 05:53

　　含硫氨基酸在不同的生物体中具有重要生物学功能,是一类功能性氨基酸,参与机体的功能调控,在DNA和蛋白质的修饰、细胞的免疫应答和氧化还原反应等过程中发挥作用。转硫途径是细胞内代谢的核心途径,因此,精确控制直接参与合成含硫氨基酸的转硫途径对于维持正常细胞功能至关重要。嗜热四膜虫是一种重要的单细胞模式生物,具有灵敏的环境响应机制和精细的细胞代谢途径。然而其细胞内转硫代谢途径并不清楚。本研究首次研究了嗜热四膜虫中转硫途径关键酶胱硫醚-γ-裂解酶,对其重组表达,活性分析和细胞内功能进行了系统分析,获得主要结果如下:1.嗜热四膜虫中胱硫醚-γ-裂解酶的酶活鉴定通过生物信息学分析,鉴定了嗜热四膜虫进化上保守的胱硫醚-γ-裂解酶基因（cystathionineγ-lyase 1,CGL1,TTHERM₀0052400）,开放阅读框1230 bp,编码409个氨基酸。在生长期高水平表达,而在饥饿期和有性生殖期维持在较低的表达水平。体外人工合成CGL1基因,构建重组表达质粒pGST-CGL1,转化大肠杆菌BL21（DE3）表达重组蛋白,亲和层析获得纯化的GST-Cgl1。酶活分析表明... 

【文章来源】：山西大学山西省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

含硫氨基酸代谢[1]

ation pathway，FTP），将源自从头合成途径产生的半胱氨酸转进一步通过甲硫氨酸循环转化为甲硫氨酸[7]。在动物和部分途径，而是通过胱硫醚 β-合酶（cystathionine β-synthase，C酶（cystathionine γ-lyase，CGL）作用的反向转硫途径（reverse traRTP），将源自甲硫氨酸分解代谢的同型半胱氨酸用于合成半体信号分子硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）等[8]。寄生性原虫（Entamoeba histolytic）具有不完全的正向转硫途径，缺种关键酶的基因，由 2 种甲硫氨酸-γ-裂解酶裂解甲硫氨酸、酸，但不能合成或裂解胱硫醚[9]。克氏锥虫（Trypanosoma CGL，在鞭毛体高表达，通过反向转硫途径产生半胱氨酸[10]。T 和 CS 活性，参与从头合成途径合成半胱氨酸[10,11]。弓形虫（ CS、CGL 和 CBS 仅在卵囊和子孢子阶段特异性表达，可能硫途径两种途径合成半胱氨酸[7]。因此，不同原生动物中进。

第一章 文献综述各种生物体，通常为同型四聚体结构，每个单体具点构成的 N-末端结构域，磷酸吡哆醛接合结构域个紧密接触的单体形成活性二聚体，在 A 亚基和点（图 1.3），随后的位点在 C 亚基和 D 亚基之间裂解酶属于磷酸吡哆醛依赖酶中的 γ 家族，催化氨[16]。在反向转硫化途径中催化 L-胱硫醚 α，γ 的消 α-酮丁酸[17]。


本文编号：3541765