媒介害虫斑布蚋绿色防控技术初步研究
发布时间：2021-12-18 21:47
斑布蚋（Simulium maculatum）是世界性分布的重要医学昆虫之一,该虫不但叮吸人、畜血液,还传播病毒及致病细菌,严重影响了新疆阿勒泰地区农业牧业生产及百姓生活。目前国内外利用生物农药和物理防治来控制斑布蚋,但效果有限。随着人们对环境保护、昆虫抗药性和杀虫剂污染等问题的日益重视,研发一种绿色高效的防控方法已迫在眉睫。本文以斑布蚋为研究对象,将行为学筛选获得的功能性绿色植物源化合物和与斑布蚋气味结合蛋白（OBP）特异性结合的功能性化合物相联系,通过野外测试,寻找有效的引诱剂及趋避剂,为斑布蚋的绿色防控提供理论指导,并开发出诱捕器产品中的防控药剂。此外,根据斑布蚋宏基因组数据筛选微生物种类组成信息为其微生物防治奠定了基础。本文主要研究结果如下:（1）从斑布蚋生境中筛选出72种绿色植物源挥发物。通过Y管双选实验筛选出功能性绿色化合物,其中对斑布蚋具有显著吸引作用的化合物共7种,分别是:邻苯二甲酸二丁酯、（-）-芳樟醇、乳香精油、NENU-2、葡萄柚精油、甜茴香精油、茶树精油。对斑布蚋具有显著趋避作用的化合物共10种,分别是:邻二甲苯、水杨酸甲酯、十二烷、亚油酸乙酯、茉莉酸甲酯、NE...
【文章来源】：东北师范大学吉林省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
斑布蚋成虫对41种植物源挥发物的行为偏好反应*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表无显著差异
东北师范大学硕士学位论文72.2结果与分析通过GraphPad.Prism.v5.0软件对Y管实验的结果进行统计。斑布蚋成虫对41种植物源挥发物有不同的选择偏好，如图2-1，实验结果发现邻苯二甲酸二丁酯、(-)-芳樟醇这两种挥发物对斑布蚋具有显著的吸引作用（p<0.001）。同时，结果显示，邻二甲苯、水杨酸甲酯、十二烷、亚油酸乙酯、茉莉酸甲酯这5种挥发物对斑布蚋具有显著趋避作用（p<0.001）。在斑布蚋成虫对31种植物精油的选择中，如图2-2，结果表明乳香、NENU-2、葡萄柚、甜茴香、茶树这5种精油对斑布蚋具有显著的吸引作用（p<0.001），而NENU-1、麝香草沉香醇百里香、薰衣草、柑橘、桉油醇迷迭香这5种精油对斑布蚋具有显著趋避作用（p<0.001）。图2-1斑布蚋成虫对41种植物源挥发物的行为偏好反应*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表无显著差异Fig2-1Simuliummaculatumadultbehaviorresponseto41plant-derivedvolatiles*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.representsnotsignificant图2-2斑布蚋成虫对31种植物精油的行为偏好反应*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表无显著差异Fig2-2Simuliummaculatumadultbehaviorresponseto31plantessentialoils*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.representsnotsignificant
东北师范大学硕士学位论文13次以保证混匀。室温静置2-4min。（3）各加入350μL的BufferP3至每个离心管，并立即温和颠倒离心管5-10次充分混匀。室温静置2min。12000×g，22℃，10min的条件进行离心。（4）将上清液移入过滤柱中，9000×g，22℃，30s的条件进行离心，收集管中的液体重复上柱一次。之后倒掉液体。（5）向吸附柱的滤膜加入500μL的WashSolution，9000×g，22℃，30s的条件进行离心，倒掉管内的液体，重复上述操作。（6）9000×g，22℃，1min的条件进行空离。（7）打开吸附柱盖子，室温静置2min，然后向滤膜中央，加入30μL的去核酸酶水，9000×g，22℃，1min的条件进行离心，使用Nanodrop上测量质粒浓度，放入-20℃冰箱保存备用。3.1.8表达载体质粒双酶切与构建pET-30a载体图谱如图3-1：图3-1pET-30a载体图谱Fig3-1pET-30avectormap（1）pET-30a表达载体双酶切：在pET-30a表达载体中，选择HindIII和EcoRI这两个内切酶将pET-30a表达载体线性化。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鲫鱼肠道蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特征[J]. 陈丰,黄亚冬,孙敬锋,吕爱军,胡秀彩,石洪玥,邢克智. 江苏农业科学. 2019(18)
[2]淡足侧沟茧蜂气味结合蛋白MpOBP8的基因克隆及原核表达分析[J]. 杨安,梅国红,张浩,蒋杰贤,季香云,陈义娟. 应用昆虫学报. 2019(02)
[3]异色瓢虫气味结合蛋白基因HaxyOBP1和HaxyOBP6的克隆及表达谱分析[J]. 韩世鹏,梁超,李新兵,韩慧,赵锋,何运转. 昆虫学报. 2019(03)
[4]8种寄主植物挥发物对橘小实蝇的引诱作用[J]. 吴健,宋学森,胡碗晴,蔡普默,陈家骅. 福建农林大学学报(自然科学版). 2018(06)
[5]昆虫肠道的宏基因组学:微生物大数据的新疆界[J]. 曹乐,宁康. 微生物学报. 2018(06)
[6]光肩星天牛气味结合蛋白AglaOBP12的基因克隆、表达及配体结合特征[J]. 李广伟,陈秀琳,尚天翠. 昆虫学报. 2017(10)
[7]气味结合蛋白MmedOBP19在中红侧沟茧蜂足部的表达及配体结合特征[J]. 杨叶青,王山宁,彭勇,单双,郑瑶,李瑞军,张永军,郭予元. 昆虫学报. 2017(06)
[8]汉逊德巴利酵母菌在胃酸、肠胆盐环境的耐受性研究[J]. 肖新云,刘又嘉,邓艳玲,谭周进. 湖南农业科学. 2016(06)
[9]昆虫外周嗅觉系统信号转导机制研究进展[J]. 杜立啸,刘杨,王桂荣. 中国科学:生命科学. 2016(05)
[10]昌吉州吸血蠓的调查研究[J]. 陈联宏,朱明福,阿依肯,虞以新. 中华卫生杀虫药械. 2016(01)
博士论文
[1]小菜蛾肠道细菌多样性分析及两株细菌的杀虫活性研究[D]. 林晓丽.西北农林科技大学 2014
[2]烟夜蛾气味受体基因和G蛋白α亚基基因的克隆与表达[D]. 乔奇.河南农业大学 2008
硕士论文
[1]两种双酰胺杀虫剂抗性品系小菜蛾肠道细菌的研究及氟苯虫酰胺降解菌的筛选[D]. 张家昊.山东农业大学 2019
[2]桔小实蝇气味结合蛋白的功能分析及雌虫引诱剂筛选[D]. 吴健.福建农林大学 2018
[3]中华按蚊气味结合蛋白（OBP）家族的全基因组鉴定和特征分析[D]. 何秀.重庆师范大学 2016
[4]新疆额尔齐斯河流域下游斑布蚋发生规律及孳生地景观因子分析[D]. 王春芳.西北农林科技大学 2015
[5]大螟气味结合蛋白基因的克隆和功能分析[D]. 金俊彦.南京农业大学 2013
本文编号：3543222
【文章来源】：东北师范大学吉林省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
斑布蚋成虫对41种植物源挥发物的行为偏好反应*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表无显著差异
东北师范大学硕士学位论文72.2结果与分析通过GraphPad.Prism.v5.0软件对Y管实验的结果进行统计。斑布蚋成虫对41种植物源挥发物有不同的选择偏好，如图2-1，实验结果发现邻苯二甲酸二丁酯、(-)-芳樟醇这两种挥发物对斑布蚋具有显著的吸引作用（p<0.001）。同时，结果显示，邻二甲苯、水杨酸甲酯、十二烷、亚油酸乙酯、茉莉酸甲酯这5种挥发物对斑布蚋具有显著趋避作用（p<0.001）。在斑布蚋成虫对31种植物精油的选择中，如图2-2，结果表明乳香、NENU-2、葡萄柚、甜茴香、茶树这5种精油对斑布蚋具有显著的吸引作用（p<0.001），而NENU-1、麝香草沉香醇百里香、薰衣草、柑橘、桉油醇迷迭香这5种精油对斑布蚋具有显著趋避作用（p<0.001）。图2-1斑布蚋成虫对41种植物源挥发物的行为偏好反应*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表无显著差异Fig2-1Simuliummaculatumadultbehaviorresponseto41plant-derivedvolatiles*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.representsnotsignificant图2-2斑布蚋成虫对31种植物精油的行为偏好反应*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表无显著差异Fig2-2Simuliummaculatumadultbehaviorresponseto31plantessentialoils*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.representsnotsignificant
东北师范大学硕士学位论文13次以保证混匀。室温静置2-4min。（3）各加入350μL的BufferP3至每个离心管，并立即温和颠倒离心管5-10次充分混匀。室温静置2min。12000×g，22℃，10min的条件进行离心。（4）将上清液移入过滤柱中，9000×g，22℃，30s的条件进行离心，收集管中的液体重复上柱一次。之后倒掉液体。（5）向吸附柱的滤膜加入500μL的WashSolution，9000×g，22℃，30s的条件进行离心，倒掉管内的液体，重复上述操作。（6）9000×g，22℃，1min的条件进行空离。（7）打开吸附柱盖子，室温静置2min，然后向滤膜中央，加入30μL的去核酸酶水，9000×g，22℃，1min的条件进行离心，使用Nanodrop上测量质粒浓度，放入-20℃冰箱保存备用。3.1.8表达载体质粒双酶切与构建pET-30a载体图谱如图3-1：图3-1pET-30a载体图谱Fig3-1pET-30avectormap（1）pET-30a表达载体双酶切：在pET-30a表达载体中，选择HindIII和EcoRI这两个内切酶将pET-30a表达载体线性化。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鲫鱼肠道蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特征[J]. 陈丰,黄亚冬,孙敬锋,吕爱军,胡秀彩,石洪玥,邢克智. 江苏农业科学. 2019(18)
[2]淡足侧沟茧蜂气味结合蛋白MpOBP8的基因克隆及原核表达分析[J]. 杨安,梅国红,张浩,蒋杰贤,季香云,陈义娟. 应用昆虫学报. 2019(02)
[3]异色瓢虫气味结合蛋白基因HaxyOBP1和HaxyOBP6的克隆及表达谱分析[J]. 韩世鹏,梁超,李新兵,韩慧,赵锋,何运转. 昆虫学报. 2019(03)
[4]8种寄主植物挥发物对橘小实蝇的引诱作用[J]. 吴健,宋学森,胡碗晴,蔡普默,陈家骅. 福建农林大学学报(自然科学版). 2018(06)
[5]昆虫肠道的宏基因组学:微生物大数据的新疆界[J]. 曹乐,宁康. 微生物学报. 2018(06)
[6]光肩星天牛气味结合蛋白AglaOBP12的基因克隆、表达及配体结合特征[J]. 李广伟,陈秀琳,尚天翠. 昆虫学报. 2017(10)
[7]气味结合蛋白MmedOBP19在中红侧沟茧蜂足部的表达及配体结合特征[J]. 杨叶青,王山宁,彭勇,单双,郑瑶,李瑞军,张永军,郭予元. 昆虫学报. 2017(06)
[8]汉逊德巴利酵母菌在胃酸、肠胆盐环境的耐受性研究[J]. 肖新云,刘又嘉,邓艳玲,谭周进. 湖南农业科学. 2016(06)
[9]昆虫外周嗅觉系统信号转导机制研究进展[J]. 杜立啸,刘杨,王桂荣. 中国科学:生命科学. 2016(05)
[10]昌吉州吸血蠓的调查研究[J]. 陈联宏,朱明福,阿依肯,虞以新. 中华卫生杀虫药械. 2016(01)
博士论文
[1]小菜蛾肠道细菌多样性分析及两株细菌的杀虫活性研究[D]. 林晓丽.西北农林科技大学 2014
[2]烟夜蛾气味受体基因和G蛋白α亚基基因的克隆与表达[D]. 乔奇.河南农业大学 2008
硕士论文
[1]两种双酰胺杀虫剂抗性品系小菜蛾肠道细菌的研究及氟苯虫酰胺降解菌的筛选[D]. 张家昊.山东农业大学 2019
[2]桔小实蝇气味结合蛋白的功能分析及雌虫引诱剂筛选[D]. 吴健.福建农林大学 2018
[3]中华按蚊气味结合蛋白（OBP）家族的全基因组鉴定和特征分析[D]. 何秀.重庆师范大学 2016
[4]新疆额尔齐斯河流域下游斑布蚋发生规律及孳生地景观因子分析[D]. 王春芳.西北农林科技大学 2015
[5]大螟气味结合蛋白基因的克隆和功能分析[D]. 金俊彦.南京农业大学 2013
本文编号：3543222
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