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基于膜融合的囊泡内凝聚体制备

发布时间:2021-12-25 07:44
  凝聚体是细胞中存在的无膜细胞器,也被用于模拟原始细胞。膜融合是细胞中普遍存在的过程,具有重要的生理功能。通过融合肽、电击穿以及静电相互作用均可实现磷脂囊泡的膜融合。本论文利用不同电性的囊泡通过静电相互作用使其发生膜融合,融合后两个腔室变成一个,导致各室的物质发生混合,在融合后的囊泡内部生成凝聚体。通过调节聚(二烯丙基二甲基氯化铵)(PDDA)与三磷酸腺苷(ATP)的浓度和比例,制备出不同尺寸的凝聚体。由ATP:PDDA=1:4(PDDA=80 m M)制备的凝聚体,尺寸较大便于观察可作为化学反应的隔室。由ATP:PDDA=1:16或1:2(PDDA=80m M)制备的凝聚体尺寸较小,可在囊泡内生成。凝聚体与带正电荷的囊泡发生静电相互作用,使囊泡在凝聚体内部聚集。进而在凝聚体内部实现了酶的级联反应:葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOx)的作用下生成过氧化氢,过氧化氢在辣根过氧化物酶(HRP)的作用下将Amplex Red氧化生成具有红色荧光的试卤灵分子。利用1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-胆碱磷酸(DLPC)/二油酰基磷脂酰丝氨酸(DOPS)制备出巨型磷脂囊泡(Giant unilamella... 

【文章来源】:哈尔滨工业大学黑龙江省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

基于膜融合的囊泡内凝聚体制备


膜融合分子机制示意图[8]

基于膜融合的囊泡内凝聚体制备


蛋白质介导囊泡融合的模型图解[9]

基于膜融合的囊泡内凝聚体制备


GUV与LUVs静电融合的图解[12]


本文编号:3552063

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