‘新泰红’桃果实线粒体DNA聚合酶基因克隆与表达水平分析

发布时间：2022-02-11 10:12

　　线粒体DNA聚合酶基因（PolIB）是植物线粒体DNA损伤修复过程中的关键基因,对维持线粒体功能,延长果实保质期具有重要作用。本研究以‘新泰红’桃为材料,利用RT-PCR技术克隆到线粒体DNA聚合酶基因PpPolIB的CDS区序列全长。基因序列分析表明,Pp PolIB基因CDS区长度为3 201 bp,编码1 066个氨基酸。编码蛋白进行生物信息学分析显示,Pp PolIB蛋白的预测的分子量为11 905.67 kD,理论等电点为7.91。利用MEGA 5.1软件构建系统进化树,结果表明PpPolIB与甜樱桃和梅花的PolIB亲缘关系较近。通过实时荧光定量PCR分析PpPolIB基因表达水平表明,与对照相比,外源NO处理能够显著延缓PpPolIB基因的下降,从而保护线粒体功能,维持桃果实贮藏品质。本研究结果为果实采后贮藏保鲜的深入研究奠定了理论基础。 

【文章来源】：分子植物育种. 2020,18(24)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

桃果实总RNA琼脂糖凝胶电泳

桃果实PolⅠB基因PCR扩增电泳

利用MEGA 5.1软件，将桃果实的PolⅠB蛋白与其他物种的PolⅠB蛋白的氨基酸序列构建系统进化树(图4)，结果发现桃果实PolⅠB与其它植物氨基酸序列有较高的同源性，其中，与甜樱桃(Prunus avium)、梅花(Prunus mume)、白梨(Pyrus x bretschneideri)、苹果(Malus domestica)、月季(Rosa chinensis)、野草莓(Fragaria vesca subsp.vesca)、酸枣(Ziziphus jujuba)、核桃(Juglans regia)、栓皮栎(Quercus suber)的相似度分别是97.94%、90.34%、72.89%、73.22%,72.25%、71.31%、63.35%、62.32%、75.72%，说明植物的PolⅠB氨基酸序列具有较高的保守性，其相似度的顺序，也与这些植物根据植物学分类系统确定的遗传距离一致。1.5 NO对冷藏桃果实Pp PolⅠB基因表达的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]人线粒体DNA聚合酶基因的克隆及序列分析[J]. 金洪涛,赵晶华,盛彦敏.  中国生物制品学杂志. 2015(09)
[2]改良CTAB法提取成熟肥城桃果实的总RNA[J]. 陈长宝,朱树华,周杰.  山东农业科学. 2009(05)

硕士论文
[1]高质量桃线粒体DNA提取技术体系的建立及线粒体基因组测序[D]. 张颖.河北科技师范学院 2019
[2]线粒体聚合酶γ的原核表达及纯化[D]. 赵晶华.长春师范大学 2015



本文编号：3620093