茂源链霉菌来源的谷氨酰胺转氨酶在革兰氏阳性菌中的表达研究

发布时间：2022-02-11 14:21

　　谷氨酰胺转氨酶（EC 2.3.2.13,transglutaminase,TG）是一种催化肽或蛋白质伯胺之间的γ-羧酰胺基团与酰胺基团发生酰基转移反应的酶。蛋白质或多肽经谷氨酰胺转氨酶催化交联后稳定性较高,对蛋白酶降解和化学损伤具有更高的抵抗力,因此,它们被广泛应用于食品、药物、纺织、材料等各个工程领域。微生物来源的谷氨酰胺转氨酶（MTG）由于底物催化范围广泛、酶活不依赖Ca2+存在等优点,成为目前的研究重点,但存在生产成本高、纯化过程复杂的问题。本文以茂源链霉菌（Streptomyces mobaraensis）来源的mtg为研究对象,为了提高MTG的产量和酶活,分别在枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）中构建MTG组成型和诱导型重组表达载体,分别对MTG的异源表达时间、诱导时间和诱导剂浓度进行优化,得到高产量重组B.subtilis菌株和重组L.lactis菌株;通过酶原激活和Ni柱纯化,得到高酶活性的MTG,相比于商品MTG,酶原激活后的MTG催化交联大豆分离蛋白的能力更强。主要实验结果如下:（1）提取S.moba... 

【文章来源】：合肥工业大学安徽省211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

谷氨酰胺转氨酶的作用机制.

图 1.2 MTG 结构示意图Fig 1.2 Schematic diagram of MTG structure功能质构建不可或缺的一类生物大分子，食品工业研究人

mtg重组表达载体在E.coli中的构建.a:pMA5mtg的构建；b:pHT43mtg的构建.Fig2.1ConstructionofmtgrecombinantexpressionvectorinE.coli.a:ConstructionofpMA5;b:ConstructionofpHT43.


本文编号：3620433