重组人2型松弛素对人支气管上皮Bease-2B细胞上皮-间质转化的抑制作用的时间相关性研究

发布时间：2022-09-28 18:16

　　目的:通过体外细胞实验探索重组人2型松弛素（RLN2）参与抑制转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导支气管上皮细胞Bease-2B细胞的上皮-间质转化（EMT）过程。方法:本研究选取Bease-2B细胞株作为模式细胞,体外培养。1)通过观察细胞形态变化初步确定TGF-β1诱导浓度以及RLN2对TGF-β1诱导的Bease-2B细胞EMT的有效干预浓度; 2) RLN2抑制TGF-β1诱导Bease-2B细胞EMT的时间:将细胞分别于TGF-β1诱导的同时和诱导24小时后加入RLN2培养24小时,及在TGF-β1诱导24小时后加入RLN2组分别作用24小时和48小时后:（1）通过观察细胞迁移能力推测RLN2不同作用时间对TGF-β1诱导的细胞EMT抑制效果;（2）通过Western bloting法检测各组间质标志ACTA2,上皮标志E-Cadhrin表达情况分析抑制效果与作用时间的关系。结果:1)观察细胞形态变化:与正常组比,10ng/mLTGF-β1诱导组Bease-2b细胞由铺路石状上皮形态逐渐变成梭形、针叶型,且细胞之间的间隙变大,胞间的连接变得松散;加不同浓度的RLN2抑制细胞... 

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【文章目录】：
1 材料
2 方法
    2.1 Bease-2B细胞的常规培养和实验前处理
    2.2 Bease-2B细胞的向间质细胞转化
    2.3 显微镜观察不同浓度RLN2对TGF-β1诱导细胞转化的影响
    2.4 RLN2作用时间对TGF-β1诱导细胞迁移能力的影响
    2.5 Western blotting法检测Bease-2B细胞在经过TGF-β1和RLN2处理不同时间后E-Cad、ACTA2蛋白的表达情况
3 结果
    3.1 RLN2作用时间对TGF-β1诱导细胞迁移能力的影响
    3.2 Western blotting法检测Bease-2B细胞在经过TGF-β1和RLN2处理不同时间后E-Cad、ACTA2蛋白的表达情况
4 讨论



本文编号：3682148