来源于嗜碱芽孢杆菌N16-5甘露聚糖利用基因簇的乙酰酯酶AesA的克隆及性质分析

发布时间：2022-10-21 09:05

　　天然来源的多糖底物上常存在乙酰基取代,特异性的乙酰酯酶能够切割这些底物上的乙酰基,从而有利于聚糖底物的进一步降解。对Bacillus sp. N16-5甘露聚糖利用基因簇上编码的乙酰酯酶AesA进行了基因克隆和异源表达,并对其酶学性质进行了研究。aesA基因长957bp,编码318个氨基酸,属于碳水化合物酯酶第7家族。AesA对4-甲基伞形酮乙酸酯（4-methylumbelliferyl-acetate）表现出较好的催化活性,金属离子Fe³⁺、Fe²⁺、Mn²⁺及Cu²⁺对AesA活性均有不同程度的促进作用。AesA与甘露聚糖酶ManA对乙酰化的甘露聚糖底物具有显著的协同作用。此项研究有助于理解嗜碱芽孢杆菌Bacillus sp. N16-5对甘露聚糖的水解机制,并且在甘露聚糖降解中具有潜在的应用前景。 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌种和表达载体
        1.1.2 主要试剂及分析软件
    1.2 方法
        1.2.1 序列分析
        1.2.2 重组菌株的构建
        1.2.3 目的蛋白的诱导表达及纯化
        1.2.4 Aes A酶活及动力学常数的测定
        1.2.5 Aes A酶学性质分析
        1.2.6 Aes A与β-甘露聚糖酶对乙酰化甘露聚糖底物协同作用的测定
2 结果与分析
    2.1 序列分析
    2.2 异源表达及纯化
    2.3 Aes A的酶活及动力学参数测定
    2.4 Aes A的酶学性质分析
    2.5 Aes A和β-甘露聚糖酶ManA对乙酰甘露聚糖底物的协同作用
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]甘露聚糖酶协同水解甘露聚糖研究进展[J]. 王瑶,王睿琪,那金,郭尚旭,赵丹.  中国农学通报. 2017(21)
[2]乙酰木聚糖酯酶研究进展[J]. 吴红丽,薛勇,刘健,甘礼惠,龙敏南.  中国生物工程杂志. 2016(03)
[3]乙酸酐对魔芋葡甘聚糖的改性[J]. 光善仪,宫晓梅,高晓燕,徐洪耀.  精细化工. 2004(07)
[4]甘露消毒丹的临床运用[J]. 张云程 ,张艳 ,张洋 ,张宏亮.  陕西中医. 2002(02)



本文编号：3695343