大鼠骨髓间质干细胞向肝细胞横向分化过程中Oct4启动子区域甲基化变化的实验研究

发布时间：2023-02-14 10:30

　　目的探讨大鼠骨髓间质干细胞横向分化为肝细胞的过程中,八聚体转录因子4(Oct4)启动子甲基化的调控机制。方法体外诱导大鼠骨髓源性肝干细胞(RBMLSC)向肝细胞横向分化,于不同时间点(0 d、7 d、14 d)提取细胞的DNA及RNA。用荧光定量PCR法检测白蛋白(ALB)和Oct4的mRNA表达水平,再用焦磷酸测序法检测Oct4基因启动子中4个CpG位点的甲基化变化。结果细胞分化过程中,与0 d组相比,7 d组和14 d组的ALB mRNA分别增加5.22倍(P <0.05)和14.7倍(P <0.001),而Oct4 mRNA分别下降0.23倍(P <0.01)和0.055倍(P <0.001);同时Oct4启动子的CpG1、CpG2、CpG3甲基化频率显著上升,7 d组均明显高于对照组和0 d组(P <0.01),14 d组又均明显高于对照组、0 d组及7 d组(P <0.01),但CpG4甲基化无明显变化。结论细胞诱导分化过程中,Oct4启动子高甲基化,导致其mRNA表达减少,从而RBMLSC多能性消失。

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 试剂与方法
    1.1 试剂
    1.2 细胞培养与诱导分化
    1.3 荧光定量PCR
    1.4 启动子甲基化
    1.5 焦磷酸测序
    1.6 统计学方法
2 结果
    2.1 肝细胞相关基因的表达
    2.2 Oct4启动子的甲基化
3 讨论
4 结论



本文编号：3742445