基于微流控技术的癌症筛查及免疫治疗初探

发布时间：2024-07-01 20:23

　　癌症是一种危害全世界人民身体健康的疾病,仅2018年新发病例达1,810万,死亡病例960万。由于其发现难、诊断难、易转移等特点,导致目前癌症的彻底性治疗研究依然很艰巨。因此,本文主要是基于微流控技术构建了恶性肿瘤无创诊断的三种方法并进行了临床应用测试。与此同时,研发了基于“肿瘤芯片”的免疫治疗途径,初步探讨了应用自然杀伤细胞(NK)分泌的外泌体来进行的肿瘤抑制效果研究,以期为临床上肿瘤筛查、治疗提供新的思路。首先,我们研发了集成的微流控芯片,可在芯片上进行尿液脱落肿瘤细胞分离、富集及芯片-ELISA定量检测,从而量化膀胱癌患者尿液样本中的脱落肿瘤细胞数量。该芯片的检测的原理,主要是基于尺寸排阻,即通过一个尺寸为在5μm的聚碳酸酯膜的微流控芯片来分离、富集尿液样本里的脱落肿瘤细胞。同时针对所分离到的细胞进行了扫描电镜、荧光染色及突变点测序分析以验证其为脱落肿瘤细胞,并利用直接ELISA方法在芯片上原位定量检测分析脱落肿瘤细胞的数量。检测结果显示:与健康的供试者相比,膀胱癌患者尿液样本里的脱落肿瘤细胞数量显著性的提高。受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,利用该芯片初筛膀胱癌的方法具有很...

【文章页数】：141 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1.12015年世界范围内因癌症在70岁以前就死亡的国家分布图l21eFig.1.1Globa

１．癌症流行性统计??癌症，是最为常见的恶性肿瘤，病因非常复杂，诊断难、治疗难。据调查统计，??癌症将成为２１世纪危害世界各国人类健康的主要原因，也将成为影响人类寿命的最??主要的障碍【１］。尤其是在世卫组织（Ｗｏｒｌｄ?Ｈｅａｌｔｈ?Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，?ＷＨＯ）于２０１....

图１．２外泌体在恶性肿瘤中的捡测方法??Ｆｉｇ．?１．２?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃａｎｃｅｒ?ｕｓｉｎｇ?ｏｆ?ｍａｌｉｇｎａｎｔ?ｔｕｍｏｒ－ｄｅｒｉｖｅｄ?ｅｘｏｓｏｍｅｓ．??

第一章癌症筛査、诊断及主要免疫防治技术研宂进展??来源的外泌体可作为肿瘤筛查的有效标志物，其检测途径一般可通过对外泌体进行分??离，再针对特异性ｍａｒｋｅｒ来分析，具体可见图１．２。??Ｄｉｒｅｃｔ?Ｑｗｉｎｔｉｆｉｃ＾ｔｉｏｉｉ??＾?＞ｉ?？?Ｓｉｎｇｌｅ?Ｃｅｌｌ?Ｄｒｏｐ....

图２．１尿液肿瘤脱落细胞捡测芯片示意图??．．

直径为２?ｃｍ的聚碳酸酯膜，膜孔径为５?ｐｍ；第四层（底板）ＰＭＭＡ板中间不切割。??每一层ＰＭＭＡ板边缘均切割有孔径为２?ｍｍ的圆孔，每一层ＰＭＭＡ板最后通过８个??螺丝穿过圆孔进行固定，完成组装（详见图２．１和２．２）。??图２．１尿液肿瘤脱落细胞捡测芯片示意图??Ｆｉｇ．?....

图2.3.利用集成的过滤芯片来分离、富集及定量检测尿液脱落肿瘤细胞工作原理

Ｆｉｇ?２．３．?Ｔｈｅ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，?ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ?ａｎｄ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｕｒｉｎａｒｙ?ｅｘｆｏｌｉａｔｅｄ?ｔｕｍｏｒ??ｃｅｌｌｓ?（ＥＴＣｓ）?ｕｓｉｎｇ?ａｎ?ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ?ｍｉｃｒｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ?....

本文编号：3999136