北京市售食品中单增李斯特菌致病力及比较基因组学研究

发布时间：2021-05-11 21:15

　　单核细胞增生李斯特氏菌是人畜共患病的病原菌。单增李斯特菌对环境具有非常强的耐受能力,在自然环境中单增李斯特分布非常广泛,可以引起各种疾病,虽然发病率低,但死亡率高（20%³0%）。为了掌握北京市市售食品中单增李斯特菌的分布、致病力及遗传多样性,本研究对北京市市售食品中的单增李斯特菌进行分离鉴定,并对分离菌株进行致病力相关因素研究、分型分析和比较基因组学分析。1.根据国标法对北京市市售食品进行单增李斯特菌分离、鉴定,以研究单增李斯特菌在食品中的分布;并应用多重PCR方法对菌株血清型进行鉴定。从470份食品样品中分离出71株单增李斯特菌,阳性率为4.0%（19/470）。其中生肉类制品的阳性率为13.4%（9/67）、即食加工食品阳性率为3.8%（9/237）、粮谷类制品阳性率为2.0%（1/49）、蔬菜水果未检出菌株（0/117）。这四类食品样品中,生肉制品更易被单增李斯特菌污染。分离菌株血清型为1/2a、1/2b和1/2c,其中1/2a血清型为优势血清型,血清型分布与食品样品种类没有必然联系。2.在单增李斯特菌的致病力影响因素研究中,分别对食品分离菌株的生物膜形成... 

【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略表
1 文献综述
    1.1 李斯特氏菌属概述
    1.2 L.monocytogene致病机理
    1.3 影响L.monocytogene致病力的相关因素
        1.3.1 生物被膜
        1.3.2 抗生素敏感性与耐药基因
        1.3.3 毒力基因
    1.4 L.monocytogene的分型
        1.4.1 血清分型
        1.4.2 噬菌体分型
        1.4.3 脉冲场凝胶电泳分型
        1.4.4 多位点序列分型
        1.4.5 核糖体分型
    1.5 全基因组测序及比较基因组学分析
        1.5.1 全基因组测序
        1.5.2 比较基因组学
    1.6 研究目的和意义
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 食品样品、菌株
        2.1.2 主要试剂、耗材
        2.1.3 仪器与设备
        2.1.4 引物序列
    2.2 实验方法
        2.2.1 菌株分离、鉴定、保存与血清型检测
        2.2.2 生物被膜形成能力、抗生素敏感性、耐药基因、毒力基因的检测
        2.2.3 脉冲场凝胶电泳分型研究
        2.2.4 全基因组测序与比较基因组学分析
3 结果与分析
    3.1 菌株分离、鉴定、保存与血清型检测
        3.1.1 菌株分离、鉴定与保存
        3.1.2 血清型检测
    3.2 生物被膜形成能力、抗生素敏感性、耐药基因、毒力基因的检测
        3.2.1 生物被膜形成能力检测
        3.2.2 抗生素敏感性检测
        3.2.3 耐药基因的检测
        3.2.4 毒力基因的检测
    3.3 脉冲场凝胶电泳分型研究
    3.4 全基因组测序与比较基因组学分析
        3.4.1 全基因组测序
        3.4.2 比较基因组学分析
4 讨论
    4.1 食品中L.monocytogene的分布及血清型
        4.1.1 食品中L.monocytogene的分布
        4.1.2 血清型
    4.2 生物被膜形成能力、抗生素敏感性、耐药基因、毒力基因
        4.2.1 生物被膜形成能力
        4.2.2 抗生素敏感性
        4.2.3 耐药基因
        4.2.4 毒力基因
    4.3 脉冲场凝胶电泳分型研究
    4.4 全基因组测序与比较基因组学分析
        4.4.1 全基因组测序
        4.4.2 比较基因组学分析
5 结论
参考文献
致谢
附录
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]食源性单核增生性李斯特氏菌毒力基因的分布[J]. 亢春雨,于宏伟,郭润芳,贾英民,张楠.  中国食品学报. 2017(03)
[2]一株含有5个原噬菌体的单增李斯特菌比较基因组分析[J]. 王旭,李骏,张昭寰,潘迎捷,欧竑宇,赵勇.  基因组学与应用生物学. 2017(02)
[3]质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1研究进展[J]. 易灵娴,刘艺云,吴仁杰,梁梓森,刘健华.  遗传. 2017(02)
[4]即食食品中单核细胞增生李斯特菌的血清学分型和毒力基因分析[J]. 马彦宁,赵悦,郭云昌,卓勤.  中国食品卫生杂志. 2017(01)
[5]李斯特菌病既往中国文献报告病例分析[J]. 孙照琨,吴璇,陈蕊,王玲玲,董家辉,郭振辉.  中国微生态学杂志. 2016(11)
[6]单核细胞增生李斯特菌喹诺酮耐药机制研究[J]. 姜晓冰,于涛,牛亚冰,徐雅梦,石磊,王海磊.  生物技术通报. 2016(07)
[7]绵羊李斯特菌在小鼠体内的感染增殖规律及诱导的细胞因子分泌[J]. 周梦莹,蒋明娟,任晨艳,刘思静,蒲启康,汪川.  现代预防医学. 2016(09)
[8]食品中单增李斯特菌的血清分型及脉冲场凝胶电泳分型[J]. 张亚红,王娉,王玮,陈颖.  食品与发酵工业. 2016(02)
[9]3例单增李斯特菌感染的病原学、临床及流行病学特征分析[J]. 王红,王艳,张正东,陈曦,邓建平,肖波,刘祥,王斌,文海,范晖,叶长芸,李群.  中国人兽共患病学报. 2015(07)
[10]一株食源性多重耐药单核细胞增生李斯特菌的耐药性研究[J]. 李丽丽,石磊,何建华,闫鹤,孟赫诚.  现代食品科技. 2015(07)

博士论文
[1]李斯特菌属常见菌种和血清型分子检测新特异性靶点基因的挖掘及其检测方法的建立[D]. 陶婷婷.南京农业大学 2016
[2]单核细胞增生李斯特菌：无菌斑马鱼感染模型及Mmp-9在抗细菌感染中的作用机制[D]. 单颖.浙江大学 2016
[3]食源性单增李斯特菌数值鉴定系统及其遗传多样性研究[D]. 吴诗.华南理工大学 2016
[4]单核细胞增多性李斯特菌分子进化与酸应激功能基因组学研究[D]. 陈健舜.浙江大学 2010

硕士论文
[1]质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1的发现[D]. 刘艺云.华南农业大学 2016
[2]食品加工环境中单核增生李斯特菌生物被膜菌群结构分析[D]. 刘彦兰.广东工业大学 2016
[3]三种分型技术对食源性单增李斯特菌分型研究[D]. 赵一鸣.华南理工大学 2015
[4]上海市食品中单核细胞增生李斯特菌污染特征与菌膜形成能力的分析[D]. 王文凯.上海交通大学 2015
[5]猪肉中单核细胞增生李斯特菌的分离与耐药性筛查[D]. 王文燕.华南理工大学 2014
[6]两个单增李斯特菌分离株的毒力测定和基因组测序及比较基因组学分析[D]. 吴永鹏.华中农业大学 2014
[7]单增李斯特氏菌的分离鉴定及抑制或降解其生物被膜的研究[D]. 王耀霞.暨南大学 2012
[8]PrfA与SigB在单核细胞增生李斯特菌生物被膜形成中的作用[D]. 冯飞飞.华中师范大学 2012



本文编号：3182120