miR-150在骨髓间充质干细胞分化中的作用及其可能的机制

发布时间：2021-06-15 09:30

　　目的采用去卵巢法建立骨质疏松模型,并研究模型中miR-150的表达情况及其影响骨质疏松过程的可能机制。方法选取C57BL/6J采用卵巢摘除法建立骨质疏松模型,micro CT检测模型中骨质情况,并分离BMSCs细胞,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原检测结果,MTT生长曲线和克隆形成情况鉴定BMSCs细胞增殖情况,RT-PCR检测模型中miR-150、RUNX-2的表达情况,转染miR-150 mimics和inhibitor后RT-PCR和Western Blot检测细胞中RUNX-2的表达情况,成骨诱导及碱性磷酸酶（ALP）染色和茜红素检测不同处理组成骨能力变化情况。结果处理2个月后实验组骨小梁明显减少,稀疏,断裂,骨含量下降;BMSCs克隆数及细胞增殖能力6 d、8 d后显著降低,miR-150内源性表达异常升高,两组BMSCs表型CD29、CD44阳性,CD34、CD45阴性。模型建立成功后,实验组中RUNX-2表达显著降低,inhibitor抑制miR-150表达后,RUNX-2表达升高,miR-150 mimics组结果变化趋势与miR-150 inhibitor组相反。与对... 

【文章来源】：黑龙江医学. 2019,43(10)

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 实验动物
    1.3 实验方法
        1.3.1 实验动物模型的建立：
        1.3.2 小鼠骨质疏松模型鉴定：
        1.3.3 BMSCs细胞培养：
        1.3.4 BMSCs细胞的鉴定：
        1.3.5 BMSCs细胞增殖能力比较：
        1.3.6 RT-PCR检测miR-150和RUNX-2的表达：
        1.3.7 Western Blot检测蛋白表达：
        1.3.8 转染对BMSCs成骨分化能力的影响：
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 microCT检测结果分析
    2.2 化学染色结果分析
    2.3 BMSCs表面抗原检测
    2.4 生长曲线比较
    2.5 克隆形成情况
    2.6 BMSCs中miR-150及RUNX-2表达检测结果
    2.7 转染对BMSCs成骨分化能力的影响结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA-150通过靶向作用于RUNX2基因抑制骨肉瘤细胞系增殖[J]. 王龙飞,王卫国,李劲松,陈世杰,詹瑞森.  中南大学学报(医学版). 2016(12)



本文编号：3230801