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CaSR在无镁细胞外液孵育神经元与心肌细胞中的表达及与MAPK通路的关系

发布时间:2021-09-12 20:32
  目的:采用经典离体动物癫痫模型,即无镁细胞外液孵育神经元导致异常放电,模拟癫痫发作过程,观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在无镁细胞外液共同孵育神经元与心肌细胞中的表达变化,探讨CaSR在无镁细胞外液孵育神经元与心肌细胞中的表达及与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated potein kinase,MAPK)通路的关系。方法:采用无镁细胞外液孵育神经元与心肌细胞,用模拟缺血培养液培养3小时后,更换为正常DMEM培养液常规培养6小时的方法建立新生大鼠神经元与心肌细胞共培养癫痫模型。利用MTT比色法、HE染色和透射电镜检测神经元与心肌细胞存活率和形态变化;Western blot等方法观察CaSR蛋白的表达。以精胺(CaSR的激动剂)和calhex231(CaSR的抑制剂)作为干预因素,Western blot检测MAPK通路的蛋白表达,观察CaSR在无镁细胞外液孵育神经元与心肌细胞中的表达及MAPK通路在其中的作用。结果:经HE染色、透射电镜结果显示对照组神经元与心肌细胞胞体完整,细胞膜无破损,完整性较好;无镁组细胞结构受损,细胞... 

【文章来源】:佳木斯大学黑龙江省

【文章页数】:48 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

CaSR在无镁细胞外液孵育神经元与心肌细胞中的表达及与MAPK通路的关系


Ca2+稳态在器官中的调节

HE染色,精胺,对照组


A B CD E图1HE 染色结果(40X10)注:A:对照组;B:无镁组;C:无镁+精胺组;D:无镁+calhex231 组;E:无镁+精胺+calhex231 组。

细胞存活率,精胺


无镁+Chalhex231 组 6 82.80±14.37无镁+精胺+Chalhex231 组 6 82.04±17.37图3 细胞存活率注:A、B、C、D、E 五组分别为对照组、无镁组、无镁+精胺组、无镁+calhex231 组、无镁+精胺+calhex231 组。△ 表示无镁组VS 无镁+精胺组显著增高(p<0.01)。四、Western blot 测定蛋白量经 Western blot 蛋白测定结果显示 Bcl-2、P-ERK 蛋白表达量对照组高于无镁组(p<0.01),而无镁组高于无镁+精胺组、无镁+精胺+calhex231 组(p<0.05)。CaSR 蛋白量对照组低于无镁组(p<0.05),无镁组低于无镁+精胺组、无镁+精胺+calhex231 组(p<0.01)。P-JNK 蛋白量对照组低于无镁组(p<0.05),无镁组明显低于无镁+精胺组

【参考文献】:
期刊论文
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[2]正常及无镁诱导后神经元微环境对少突胶质前体细胞分化的影响[J]. 王玥,蒋莉,刘丽鸣,杨霞,陈恒胜,程莉.  重庆医科大学学报. 2016(08)
[3]钙敏感受体表达和Pi3k/Akt通路调控癫痫大鼠心肌细胞凋亡的研究[J]. 王丽敏,韩小唯,王超,张鑫阳,王淑静,白玲玲,孙艳秋,郭津.  中国儿童保健杂志. 2016(05)
[4]Magnesium and type 2 diabetes[J]. Mario Barbagallo,Ligia J Dominguez.  World Journal of Diabetes. 2015(10)
[5]钙敏感受体通过G蛋白-PLC-IP3信号途径调节肺动脉张力[J]. 李光伟,苗宏志,李波,王国忠,金莉,林岩,邓志会,肖微.  中国病理生理杂志. 2015(01)
[6]细胞育龄期对建造发育期大鼠海马神经元癫痫细胞模型成功率的影响[J]. 焦聚,马融.  中医儿科杂志. 2014(03)
[7]动脉硬化大鼠心肌钙敏感受体表达增加通过激活MAPK通路诱导细胞凋亡[J]. 郭津,徐长庆.  中国科技论文在线. 2011(03)
[8]心血管系统钙敏感受体的研究进展[J]. 徐长庆,张伟华.  中国病理生理杂志. 2010(02)
[9]脑心综合征[J]. 龙洁.  中国实用内科杂志. 1997(11)

硕士论文
[1]钙敏感受体在小鼠缺血性脑卒中的作用及机制[D]. 甄毅岚.安徽医科大学 2014



本文编号:3394900

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