miRNA调控内皮祖细胞Wnt信号通路参与牵张成骨血管发生机制的初步研究

发布时间：2021-09-24 19:23

　　目的:牵张成骨具有骨折愈合不可比拟的成骨速率,但至今其成骨机制尚未明了。课题组在前期研究中发现内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）表面标记物CD133在牵张成骨新骨区域具有较高的表达,期间可能存在EPCs参与的血管发生机制;并且,利用高通量测序技术对牵张成骨区域、胚胎骨、骨折断端等组织的miRNAs进行表达量聚类分析,发现miRNA-21,miRNA-10,miRNA-451,mi RNA-27b,mi RNA-486,miRNA-205在牵张成骨区域及胚胎骨中具有共同表达。因此,我们推测上述miRNAs可能通过调控靶基因进而调控EPCs血管发生,从而促进新骨形成。本实验拟从miRNA的角度初步探索EPCs成血管分化机制。方法:1.EPCs体外分离培养、鉴定及成血管能力检测的研究:抽取3W龄幼犬骨髓约5ml,采用密度梯度离心法分离获取EPCs后:（1）通过倒置像差显微镜下观察EPCs的形态学特点;（2）通过流式细胞仪检测EPCs表面标志物;（3）通过细胞周期流式分析检测EPCs增殖能力;（4）通过Transwell迁移实验及细胞划痕实验检测E... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

培养第5-7d细胞形态(A,B×400)

流式细胞仪检测 EPCs 表面标志的结果经流式细胞仪检测发现，本实验所分离培养的犬 EPCs 可表达表面抗图 1-3 培养 14-21d 细胞形态(A, B×400)Fig.1-3 Cell morphology after culture 14-21d (A, B×400)

3）培养至 14-21d 时可见细胞呈长梭形，细胞间形成集落，呈多个克涡状生长，最终呈现管腔结构，具有明显的成血管倾向(图 1-3)。图 1-2 7-10d 传代后细胞形态(A, B×400)Fig.1-2 After 7-10d, the cells were passed into the postnatal form (A, B×400)

【参考文献】：
期刊论文
[1]机械离心力对成骨细胞骨形态发生蛋白信号通路中Runx-2 mRNA的影响[J]. 段峰,关键,杨红岩,王心彧,张国梁,朱杨.  中国组织工程研究. 2014(33)
[2]牵张成骨研究中的几个热点问题[J]. 周诺.  口腔颌面外科杂志. 2011(04)
[3]Endothelial progenitor cells as factors in neovascularization and endothelial repair[J]. Stefano Capobianco,Venu Chennamaneni,Mayank Mittal.  World Journal of Cardiology. 2010(12)



本文编号：3408307