腺相关病毒增强型小鼠白介素10质粒的构建及表达

发布时间：2024-06-29 14:33

　　一目的： 1 构建腺相关病毒增强型小鼠白介素10质粒(pORF-ITR-mIL-10)并进一步证实ITR能增加mIL-10在心肌细胞内的表达，为体内实验提供必要的实验依据。 二方法： 1 利用分子克隆技术，将AAV中的ITR插在pORF5-mIL-10质粒启动子的上游，构建pORF-ITR-mIL-10质粒。 2 在阳离子脂质体Lipofectin介导下，pORF5-mIL-10和pORF-ITRS-mIL-10分别转染原代培养心肌细胞。 3 Trizol一步法提取总RNA，RT-PCR检测mIL-10的mRNA。 4 ELISA检测培养细胞上清中mIL-10的表达。 三结果： 1 用双酶切方法证实成功构建pORF-ITR-mIL-10。 2 分别在转染24h、48h、72h、96h、120h后，用RT-PCR在心肌细胞中检测到相应的目的条带。 3 ELISA检测显示pORF-ITR-mIL-10的表达量明显高于pORF5-mIL-10。 四结论： 1 在阳离子脂质体Lipofectin介导...

【文章页数】：33 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
一、 论文摘要
    前言
    中文摘要
    英文摘要
二、 论文
    材料
    腺相关病毒增强型mIL-10质粒的构建
    结果
    讨论
    参考文献
三、 综述
    正文
    参考文献
四、 致谢



本文编号：3997697