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高致病性PRRSV毒株的分离及PRRSVRT-LAMP检测方法的分析

发布时间:2024-03-07 20:23
  猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的高度接触性病毒传染病,以仔猪呼吸障碍及妊娠母猪、公猪生殖障碍为主要特征,是严重危害全球养猪业的疾病之一。该病毒分为北美型和欧洲型两个血清型,我国流行的PRRSV毒株主要为北美型PRRSV毒株。本研究对吉林地区两个猪场的病猪进行了病料采集,在Marc-145细胞上进行了病毒的分离,经盲传后,病毒可在Marc-145细胞上产生明显的病变,经RT-PCR和免疫荧光鉴定,证明所分离到的病毒为PRRSV。将分离到的病毒分别命名为JILINTN1株和JILINTN2株。 根据GenBank中PRRSV HUN4株的序列设计引物,通过RT-PCR成功扩增了PRRSVJILINTN1和JILINTN2株的ORF567和NSP2基因。并将其克隆到pMD18-T载体上,通过测序和生物信息学分析我们发现:针对GP5核苷酸序列的进化树显示JILINTN1和JILINTN2株与其他北美型PRRSV毒株处在同一分支上,这两个毒株的GP5,M和N基因与其他北美型的毒株同源性很高而与欧洲型毒株很低,说明这两个毒株属于北美型的毒株。对NSP2区...

【文章页数】:52 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1-1PRRSV基因开放阅读框结构示意图

图1-1PRRSV基因开放阅读框结构示意图

(mRNA1-mRNA7),每个亚基因mRNA转录子能够翻译一个或两个开放阅读框(ORF)[32]。病毒RNA(mRNA1)能够翻译两个开放阅读框:ORF1a和ORF1b。ORF1a编码pp1a多聚蛋白。ORF1b通过核糖体框的转移,形成pp1ab多聚蛋白[3....


图1-2猪繁殖与呼吸综合症病毒粒子电镜图和结构示意图

图1-2猪繁殖与呼吸综合症病毒粒子电镜图和结构示意图

图1-2猪繁殖与呼吸综合症病毒粒子电镜图和结构示意图Fig.1-2ThevirionofPRRSV.(A)electronmicrographofextracelluarPRRSVparticles.Bar.23nm.(Snijderetal.....


图3-2正常的Marc-145细胞(10X)

图3-2正常的Marc-145细胞(10X)

图3-2正常的Marc-145细胞(10X)图3-3JILINTN1株病变细胞图(10X)Figure3-2NormalMarc-145cellmonolayer(10X)Figure3-3CytopathiceffectoftheJI....


图3-3JILINTN1株病变细胞图(10X)

图3-3JILINTN1株病变细胞图(10X)

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本文编号:3921665

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