免疫荧光技术在DPV UL10和UL48蛋白定位中的应用

发布时间：2024-03-19 04:21

　　根据本实验室鉴定的鸭瘟病毒(DPV)UL10基因和UL48基因,开展了鸭瘟病毒在感染鸭胚成纤维细胞后,应用免疫荧光技术对UL10和UL48基因的表达产物在细胞中分布特征的检测。获得如下的结果：1、UL10蛋白的细胞定位结果显示特异性荧光可在鸭瘟病毒感染4h后在细胞质中检测到,在细胞核内存在少量的荧光,随着感染时间的延长,在细胞质中出现的特异性荧光会逐渐的增多,在感染后期,荧光逐渐向细胞膜推移,感染后48h,UL10基因表达的量达到了最大值,特异性荧光最多,感染后72h,特异性荧光开始明显的减弱,部分细胞核已经发生了皱缩,细胞质开始出现破碎。2、UL48蛋白的细胞定位结果显示特异性荧光可在鸭瘟病毒感染1h后就在细胞质中检测到,随着感染时间的延长,在细胞质中出现数量较多的特异性荧光,且随着时间的推移,更多的荧光逐渐向细胞核膜推移,在感染后9h,UL48基因表达量是达到了最大值,在细胞质中可以观察到大量的荧光物质,在感染后24h,特异性荧光开始明显的减弱,在感染后72h,细胞内存在的的荧光量已经很少,部分细胞核已经发生了皱缩和破碎,细胞质中出现了明显的空泡。

【文章页数】：38 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
一、引言
    1 疱疹病毒UL10基因和UL48基因及其编码蛋白研究
        1.1 疱疹病毒的概述
        1.2 鸭瘟病毒的概述
    2 DPV UL10和UL48基因及其相关蛋白研究
        2.1 疱疹病毒UL10基因及其编码的gM蛋白的相关研究
        2.2 疱疹病毒UL48基因及其编码的VP16蛋白的研究进展
    3 展望
二、试验研究
    1 材料
        1.1 毒株/细胞
        1.2 主要试剂及配制
        1.3 主要仪器设备
    2 实验方法
        2.1 兔抗高免血清UL10和UL48的纯化及鉴定
        2.2 间接免疫荧光检测DPV UL10和UL48在细胞内分布特征方法的的建立及优化
        2.3 DPV UL10和UL48基因产物在细胞内分布的动态监测
    3 实验结果
        3.1 兔抗UL10蛋白和UL48蛋白IgG的纯化的SDS-PAGE鉴定结果
        3.2 特异性试验结果
        3.3 DPV UL10和UL48蛋白亚细胞定位的动态监测结果
    4 讨论
        4.1 关于蛋白在细胞内分布的研究方法
        4.2 DPV UL10宿主亚细胞定位与病毒增殖相关性的初步探讨
        4.3 DPV UL48宿主亚细胞定位与病毒增殖相关性的初步探讨
三、结论
参考文献
致谢



本文编号：3932320