鸡源大肠杆菌毒力基因检测及分子流行特征

发布时间：2024-03-22 21:55

　　【目的】本试验旨在阐明鸡源大肠杆菌致病性及分子流行特性,为探索大肠杆菌流行途径制定合理的防控策略提供新思路。【方法】2018–2019年在河北省采集病死鸡肝脏样品,通过选择培养基筛选、生化鉴定、血清凝集试验对分离菌株进行系统鉴定,应用PCR方法检测分离株中毒力基因流行情况。参考系统发育群分类方法对大肠杆菌进行分群分析,并参照McMLST网站数据库提供的7对管家基因序列进行多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)分析。【结果】结果显示,56株分离株符合大肠杆菌生化特征,分为8个生化表型,B4(30.36%)、B5(25%)和B2(23.21%)为主要生化表型。56株分离株大肠杆菌血清凝集试验均呈阳性,分为11种血清型,O₇₈(26.79%)、O₂(23.21%)、O₁₅₇(17.86%)和O₁(14.29%)为主要流行血清型。56株大肠杆菌共检测出15种肠外大肠杆菌毒力基因,未检出papC、ibeA和ibeB基因。黏附相关基因fimC和抗血清存活因子相关基因o...

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【部分图文】：

图1.大肠杆菌系统进化群鉴定表

参考文献报道的大肠杆菌系统发育群分类方法[15–18]，应用PCR法对分离的大肠杆菌进行系统发育分群鉴定。PCR扩增体系为25μL:2×TaqPCRMasterMix12.5μL，上下游引物各1μL,DNA模板2μL,ddH2O8.5μL。PCR扩增条件：94°C5....

图2.56株大肠杆菌对各生化试剂反应阳性率

对初步分离确定的56株大肠杆菌先通过PCR技术对大肠杆菌O血清型进行初步鉴定，共检测出56株大肠杆菌共分为11种血清型。分别为O1、O2、O5、O6、O9、O18、O45、O65、O78、O91和O157。根据PCR鉴定结果，购买这11种O抗原血清进行血清凝集试验，共鉴定出11种....

图3.大肠杆菌血清型鉴定结果

图2.56株大肠杆菌对各生化试剂反应阳性率2.2毒力基因检测结果

图4.ExPEC毒力基因的检出率

本试验大肠杆菌分离株共检出stx1、stx2、aggR和stlb四种毒力基因，根据毒力基因的不同，分为以下三类肠道致病性大肠杆菌，分别为EHEC(n=20)、EAEC(n=4)和ETEC(n=2)菌株，未检出EPEC、DAEC与EIEC(图5-A)。EHEC菌株中stx2....

本文编号：3935004