肠道共生菌感染基因敲除小鼠后黏膜免疫的变化及中药成分的改善作用与机制研究

发布时间：2024-03-19 20:03

　　肠道内环境的稳定与肠道菌群、机体的遗传因素和免疫反应密切相关。肠道共生菌在一定条件下可以打破肠道内环境的平衡状态,诱发T细胞介导的免疫应答,严重威胁人类和动物健康。肠道黏膜免疫系统在维持肠道内环境的稳定中发挥着关键作用,探索肠道共生菌对肠道黏膜免疫的调节作用及其机制已成为当前研究热点之。一。大肠杆菌E. coli NC 101和粪肠球菌E. faecalis是肠道共生菌,在人和动物的肠道均可分离得到。当机体免疫功能正常时,其与机体和谐共存;如果机体的免疫功能发生异常(如缺乏IL-10),会引发异常的肠道黏膜免疫反应,进而导致腹泻和肠炎。IL-10对调节肠道黏膜免疫系统的平衡起着至关重要的作用。IL-10基因敲除小鼠是研究肠道黏膜免疫应答的经典动物模型,其免疫系统在无菌环境中处于静息状态,但是在SPF环境中,在肠道共生菌的刺激下可以发生T细胞介导的免疫反应。本研究采用无菌级129品系野生型和IL-10基因敲除小鼠,开展了E.coliNC 101单一感染产生的IL-10对机体肠道黏膜免疫的调节作用及相关机制研究;探索了单一感染E.coli NC 101对C57B6品系IL-10基因敲除小鼠...

【文章页数】：144 页

【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
本文部分缩略词的中英文对照
前言
第一篇 文献综述
    第一章 肠道共生菌与肠道黏膜免疫
        1 大肠杆菌与粪肠球菌概述
            1.1 大肠杆菌的生物学性状
            1.2 大肠杆菌的致病性
            1.3 大肠杆菌的微生物学检查
            1.4 粪肠球菌概述
        2 肠道黏膜免疫的防御机制
            2.1 微生物与黏膜上皮屏障
            2.2 肠道抗原递呈细胞
            2.3 抗微生物肽
            2.4 上皮和黏膜固有层的免疫细胞
            2.5 微生物促进免疫反应的形成
        3 肠道共生菌与肠道内环境稳定
            3.1 肠道共生菌
            3.2 宿主易感基因
            3.3 肠道免疫反应
            3.4 环境因素
            3.5 实验动物模型
        4 结论与展望
        参考文献
    第二章 中药成分的免疫调节作用
        1 中药成分对天然免疫的影响
        2 中药成分对获得性免疫的影响
        3 中药成分的抗炎作用
        参考文献
第二篇 试验研究
    第三章 E.coli NC 101感染诱导机体产生的IL-10对黏膜免疫细胞因子的调节作用研究
        1 材料与方法
            1.1 实验动物和菌株
            1.2 仪器
            1.3 主要试剂
            1.4 细菌裂解物的制备
            1.5 试验设计
            1.6 数据统计与分析
        2 试验结果
            2.1 单一感染E.coli NC 101诱导129 IL-10基因敲除小鼠和129野生型小鼠产生的免疫反应
            2.2 单一感染E.coli NC 101对129野生型小鼠肠道局部分泌IFN-γ和IL-10的影响
            2.3 IL-10重组蛋白对单一感染 E.coli NC 101的129野生型小鼠MLN分泌IFN-γ的影响
            2.4 体外阻断IL-10信号传导通路对单一感染 E.coli NC 101的129野生型小鼠MLN分泌IFN-γ的影响
            2.5 体内阻断IL-10信号传导通路对单一感染 E.coli NC 101的129野生型小鼠肠道局部分泌IFN-γ和IL-10的影响
        3 讨论
        参考文献
    第四章 单一感染E.coli NC 101诱导C57B6 IL-10基因敲除小鼠产生的免疫反应研究
        1 材料与方法
            1.1 实验动物与菌株
            1.2 仪器
            1.3 主要试剂
            1.4 细菌裂解物的制备
            1.5 试验设计
            1.6 数据统计与分析
        2 试验结果
            2.1 单一感染E.coli NC 101对C57B6 IL-10基因敲除小鼠肠道组织学的影响
            2.2 单一感染E.coli NC 101对C57B6 IL-10基因敲除小鼠肠组织自发分泌IL-12/23p40的影响
            2.3 单一感染E.coli NC 101对C57B6 IL-10基因敲除小鼠脾脏免疫反应的影响
            2.4 单一感染E.coli NC 101对C57B6 IL-10基因敲除小鼠脾脏CD4⁺T细胞的活化反应
        3 讨论
        参考文献
    第五章 ATG16L1、MyD88和NOD2基因调节细胞抗原递呈功能的比较研究
        1 材料与方法
            1.1 实验动物和菌株
            1.2 仪器
            1.3 主要试剂
            1.4 细菌裂解物的制备
            1.5 试验设计
            1.6 数据统计与分析
        2 试验结果
            2.1 ATG16L1、MyD88和NOD2基因对大肠杆菌E.coli NC 101和 E coli K12在脾脏巨噬细胞存活的影响
            2.2 ATG16L1、MyD88和NOD2基因对抗原递呈细胞递呈E.coli NC 101功能的影响
            2.3 ATG16L1基因对大肠杆菌E.coli NC 101刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞分泌细胞因子的影响
            2.4 ATG16L1基因对大肠杆菌E.coli NC 101刺激小鼠骨髓来源抗原递呈细胞分泌细胞因子的影响
        3 讨论
        参考文献
    第六章 苦参碱对IL-10基因敲除小鼠自发产生肠炎的治疗作用及其黏膜免疫机制研究
        1 材料与方法
            1.1 实验动物与菌株
            1.2 仪器
            1.3 主要试剂
            1.4 盲肠菌群裂解物的制备
            1.5 试验设计
            1.6 数据统计与分析
        2 试验结果
            2.1 苦参碱降低了自发产生肠炎小鼠的体重损失及结肠长度
            2.2 苦参碱对自发产生肠炎小鼠组织学的影响
            2.3 苦参碱对自发产生肠炎小鼠结肠组织自发分泌的细胞因子的影响
            2.4 苦参碱对自发产生肠炎小鼠肠黏膜细胞免疫的影响
            2.5 苦参碱对自发产生肠炎小鼠肠系膜淋巴细胞亚群的影响
            2.6 苦参碱对自发产生肠炎小鼠结肠组织中炎性细胞因子mRNA表达的影响
        3 讨论
        参考文献
全文总结
全文创新点
致谢
攻读博士学位期间发表论文



本文编号：3932566