MT01对牙龈卟啉单胞菌感染的成骨细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

发布时间：2016-11-26 15:02

  本文关键词：MT01对牙龈卟啉单胞菌感染的成骨细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

《吉林大学》 2016年

MT01对牙龈卟啉单胞菌感染的成骨细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

于海蛟  

【摘要】：牙周炎是菌斑微生物与宿主免疫系统之间复杂的相互作用所导致的慢性感染性疾病,其引起的牙槽骨吸收已经成为成人失牙的首位原因。牙周炎不单影响咀嚼、发音、进食等功能,并且严重影响患者的身心健康和生活品质。菌斑微生物是牙周炎发病的始动因子,细菌及其毒性产物可侵入并破坏牙周组织,诱发初期炎症反应。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是目前公认的牙周致病菌,其毒力因子可直接参与牙周支持组织的破坏以及间接引起宿主的免疫炎症反应,抑制成骨细胞的分化及骨形成,从而导致牙槽骨吸收,造成牙齿丧失。特定序列寡核苷酸MT01是一类根据人线粒体DNA序列设计不含CG基序的单链寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN),为抑制性ODN。已证实,MT01能阻断Toll样受体9(Toll-like receptors9,TLR9)信号通路的激活,进而调控TLR9所引起的机体固有免疫应答反应,从而抑制由病原体感染引起的过度、有害的免疫反应。动物实验证实,MT01能够抑制实验性大鼠牙周炎导致的牙槽骨吸收,同时体外研究表明,MT01能增强成骨细胞成骨功能,促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。整合MT01免疫负调节活性及其在牙槽骨改建中促进成骨的作用,我们推测,MT01可能会对牙周炎炎性免疫应答具有干预和调控作用。因此,本实验拟采用Pg感染人成骨细胞MG63,研究MT01对感染状态下MG63细胞增殖、周期及凋亡等生物学特性的影响,为进一步探讨MT01对牙周炎的调控作用奠定实验基础。方法:以人成骨细胞MG63为目的细胞,分别加入MT01、Cp G ODN、甲硝唑和庆大霉素共培养3 h后,按感染复数100∶1的比例加入Pg共培养。设立PBS作为空白对照,共分为6个组:空白对照组(PBS)、阴性对照组(仅加Pg)、实验组(MT01+Pg)、阳性对照A组(Cp G ODN+Pg)、阳性对照B组(甲硝唑+Pg)、阳性对照C组(庆大霉素+Pg)。6组细胞分别孵育24、48小时。采用MTT法检测MG63细胞的增殖、流式细胞仪检测MG63细胞的细胞周期及凋亡,进行两两组间比较。结果:MT01+Pg组细胞增殖高于空白对照组(P0.05),G1期细胞百分比低于阴性对照组,而S期细胞百分比高于阴性对照组(P0.05),细胞早期凋亡率低于阴性对照组(P0.05)结论:MT01可促进感染状态下成骨细胞增殖,降低G1期细胞百分比,促使细胞进入S期并抑制细胞早期凋亡。

【关键词】：
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R781.4
【目录】：

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