“钛骨”表面纳米掺锌钙磷涂层的骨诱导性探究

发布时间：2017-05-25 14:00

  本文关键词：“钛骨”表面纳米掺锌钙磷涂层的骨诱导性探究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的： 在新型种植体“钛骨”表面构建掺入不同浓度锌的纳米级钙磷涂层；通过体外细胞实验检测此种生物涂层对MG63细胞早期黏附、增殖、分化、基质矿化的影响并由此筛选出最适当掺入锌浓度。 方法： 运用计时电位-电化学沉积法在“钛骨”表面构建不同浓度纳米掺锌钙磷涂层；以单纯细胞组作空白对照组，纯“钛骨”组作阴性对照组，分别掺入锌的Zn/(Ca+Zn)摩尔比分别为0%、10%、20%、30%的钙磷涂层组为实验组，，将材料与MG-63细胞共培养；在1h时通过DAPI染色定性检测各组黏附细胞量、于1、4、7天通过CCK-8法评估材料对细胞增殖的影响、第7天定量检测胞内AKP活性、第14天通过BCA法定量测定细胞总蛋白浓度、第9、14天通过Real-TimePCR检测成骨相关基因RUNX2、OCN、Osterix mRNA的相对表达水平、第9、14、21天通过Westernblot测定基质矿化相关蛋白Collagen I及BSP表达量。 结果： 1、“钛骨”表面纳米掺锌钙磷涂层可促进共培养1h后MG63细胞的早期黏附，其中掺入20%Zn-HA组及30%Zn-HA组对细胞黏附的促进作用相对更明显； 2、“钛骨”表面纳米掺锌钙磷涂层在第4、7天能明显促进MG63细胞早期增殖，在第7天20%Zn-HA涂层对细胞增殖的促进作用最显著； 3、与对照组相比，第7天实验组可上调MG-63中AKP活性，其中20%掺锌组的促进效果最明显； 4、与空白及阴性对照组相比，20%Zn-HA组能明显促进总蛋白表达量； 5、在细胞促基质矿化期的第9、14天时，20%掺锌组可上调RUNX2、OCN、Osterix mRNA表达量； 6、在矿化早期及晚期，20%Zn-HA对MG-63中成骨相关蛋白Collagen I及BSP的表达量起正性调节作用。 结论： 1、钛骨表面纳米掺锌钙磷涂层在成骨样细胞的早期黏附、早期增殖、早期分化、后期分化、基质矿化等成骨想过过程中都能发挥积极作用； 2、在掺入不同锌浓度的钙磷涂层中，20%摩尔比对成骨的促进作用最强； 3、锌离子的生物活性具有浓度依赖性，30%组中释放的锌离子浓度可能存在细胞毒性。 4、成骨样细胞更易在纳米级粗糙表面附着；不易在边缘尖锐的表面附着。
【关键词】：锌 钙 磷 表面涂层 电化学沉积 骨诱导性 钛骨
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R783.1
【目录】：

• 引言4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-12
• 英文缩略语表12-13
• 第1章 绪论13-20
• 1.1 纳米掺锌钙磷涂层的理化性能及抑菌性13-15
• 1.1.1 锌在钙磷涂层中的结合形式13-14
• 1.1.2 锌对钙磷涂层理化性能的影响14
• 1.1.3 掺入锌的抑菌性及机制14-15
• 1.2 纳米掺锌钙磷涂层的生物学性能15-20
• 1.2.1 钙磷涂层对成骨的影响15
• 1.2.2 钙促成骨机制15-16
• 1.2.3 磷促成骨机制16
• 1.2.4 锌对成骨的影响16-17
• 1.2.5 锌促成骨机制17-20
• 第2章 材料与方法20-28
• 2.1 实验设备与材料20-22
• 2.1.1 主要实验设备20-21
• 2.1.2 主要实验试剂及材料21-22
• 2.2 实验方法22-28
• 2.2.1 “钛骨”表面纳米掺锌钙磷涂层的构建22
• 2.2.2 生物性能评估22-28
• 第3章 实验结果28-37
• 3.1 DAPI 染色28-29
• 3.2 CCK-8 测定早期增殖29-31
• 3.3 AKP 活性检测31-32
• 3.4 BCA 法检测细胞总蛋白浓度32-33
• 3.5 Real-Time PCR 检测 OCN、Osterix、Runx2 mRNA 表达水平33-36
• 3.6 Westernblot 检测 BSP 及 Collagen I 表达水平36-37
• 第4章 讨论37-46
• 4.1 MG-63 细胞的选择及培养38
• 4.2 钛骨38-39
• 4.3 DAPI 染色39-40
• 4.4 CCK-8 检测40-41
• 4.5 AKP 检测41-43
• 4.6 蛋白总浓度检测43
• 4.7 Real-Time PCR 检测 OCN、Osterix、Runx2 mRNA 的表达水平43-44
• 4.8 Westernblot 检测 BSP、Collagen I 水平44-46
• 第5章 结论46-47
• 参考文献47-52
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果52-53
• 致谢53-54

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本文编号：393922