PLGA-HA-PVA支架复合兔软骨细胞的动物体内实验研究

发布时间：2017-05-26 13:11

  本文关键词：PLGA-HA-PVA支架复合兔软骨细胞的动物体内实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：比较各种不同PVA配比的复合支架诱导兔软骨细胞体外和体内异位成软骨能力。 方法：(1)选取8周龄新西兰大白兔膝关节软骨,消化、分离后进行体外细胞培养并鉴定；(2)制备不同PVA配比的的PLGA-HA-PVA复合材料,接种第3代兔膝关节软骨细胞进行体外培养并分析其成软骨情况；(3)将体外混合培养7天的支架,植入裸鼠背部皮下；分别于不同时间点取出标本,分析其成软骨情况。 结果：(1)通过胶原酶消化、机械分离能成功获得兔软骨细胞；(2)在不添加诱导因子的情况下,PLGA-HA-PVA复合支架能作为细胞支架促进软骨细胞的增殖,其中配比为15wt%PVA,5wt%HA,30wt%PLGA的复合支架适合作为细胞支架；(3)在不添加诱导因子的情况下,PLGA-HA-PVA复合支架/兔软骨细胞复合物能在裸鼠皮下异位增殖,其中配比为15wt%PVA,5wt%HA,30wt%PLGA的复合支架效果更佳。 结论：不添加诱导因子的情况下PLGA-HA-PVA复合支架能在体外和体内异位促进兔软骨细胞增殖,其中配比为15wt%PVA,5wt%HA,30wt%PLGA的复合支架效果更佳。
【关键词】：组织工程 软骨支架 软骨损伤 聚乙烯醇 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 羟基磷灰石
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R684;R318.08
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 目录6-7
• 1. 绪论7-9
• 2. 材料与实验方法9-18
• 2.1 主要的实验试剂和仪器9-11
• 2.2 支架材料的制备11-12
• 2.3 软骨细胞的分离、培养与鉴定12-13
• 2.4 PLGA-HA-PVA复合水凝胶与软骨细胞复合体外培养13-14
• 2.5 PLGA-HA-PVA与软骨细胞复合体植入裸鼠背部皮下14
• 2.6 实验标本的处理14-15
• 2.7 实验标本的检测方法15-17
• 2.8 实验数据的处理17-18
• 3. 结果18-28
• 3.1 复合支架的制备18
• 3.2 软骨细胞的鉴定和培养18-20
• 3.3 软骨细胞与支架体外混合培养20-23
• 3.4 软骨细胞与支架复合培养后裸背部皮下异位培养23-28
• 3.4.1 体内异位培养复合支架的大体观察23
• 3.4.2 II型胶原免疫组化（图3.4.2)23-25
• 3.4.3 HE 染色（图 3.2.2)25-26
• 3.4.4 II型胶原和GAG总量测定26-28
• 4. 讨论28-30
• 5. 结论30-31
• References31-33
• 综述33-48
• References41-48
• 致谢48

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 Qichun Chen;Qiang Zuo;Qianqian Hu;Yang Feng;Weiding Cui;Weimin Fan;Yuefen Zou;;Morphological MRI and T2 mapping of cartilage repair tissue after mosaicplasty with tissue-engineered cartilage in a pig model[J];The Journal of Biomedical Research;2014年04期

2 张鹏;王青;;关节软骨损伤后治疗的研究进展[J];实用老年医学;2014年11期

3 刘耀升;刘蜀彬;;软骨组织工程研究中细胞源-软骨细胞和成纤维细胞[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年11期

4 钱赫亮;;运动性半月板损伤及组织工程半月板的应用[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年11期

5 崔磊,尹烁,邓辰亮,杨光辉,陈富国,刘伟,刘德莉,曹谊林;软骨形态发生蛋白1诱导真皮成纤维细胞表达软骨细胞表型的实验研究[J];中华医学杂志;2004年15期

6 何清义,李起鸿,许建中;两种诱导方法对去分化软骨细胞II型胶原的诱导[J];中国矫形外科杂志;2004年Z4期

7 赵贵庆;崔磊;曹谊林;;组织工程半月板的研究进展[J];组织工程与重建外科杂志;2009年03期

8 马晓飞;朱明;张艳;柴岗;;真皮成纤维细胞多向分化潜能的研究进展[J];组织工程与重建外科杂志;2011年06期

9 涂以济;吴添龙;徐浚怀;叶爱芳;钟贞浩;程细高;;兔骨髓间充质干细胞在藻酸锶凝胶中体外三维培养的实验研究[J];中国矫形外科杂志;2014年07期

10 扶世杰;杨本伍;舒从科;邓小文;李廷富;;少阳生骨方对大鼠在体软骨损伤关节液IL-1β及软骨修复组织Ⅱ型胶原影响的实验研究[J];分子诊断与治疗杂志;2014年03期

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1 张颖;胶原蛋白支架复合自体BMSCs修复关节软骨缺损动物实验研究[D];第三军医大学;2011年

2 李宝军;脂肪间充质干细胞体外诱导及复合PLGA体内异位成软骨的实验研究[D];中南大学;2007年

3 吴剑宏;三维培养兔自体关节软骨细胞修复关节软骨缺损的实验研究[D];第二军医大学;2007年

4 叶川;人脂肪间充质干细胞与PHBV构建组织工程化软骨的研究[D];中南大学;2008年

5 周全;IGF-1诱导和促进脂肪间充质干细胞体内外软骨形成[D];中南大学;2008年

6 石宏;阻抑蛋白多糖合成对涎腺腺样囊性癌生长的影响[D];河北医科大学;2008年

7 邓天政;组织工程骨—软骨复合组织的构建及体内外形态学观察的实验研究[D];第四军医大学;2008年

8 符培亮;自体滑膜间充质干细胞—小肠粘膜下层复合物修复兔半月板损伤的实验研究[D];第二军医大学;2009年

9 胡小红;软骨修复用水凝胶的制备和性能研究[D];浙江大学;2009年

10 汪国友;少阳生骨方对SD大鼠体外软骨细胞培养及在体软骨损伤影响的实验研究[D];成都中医药大学;2013年

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1 黄林生;鸡胚真皮间充质干/祖细胞分离培养与诱导分化研究[D];湖南农业大学;2011年

2 邹立学;辛伐他汀对兔髓核细胞影响的实验研究[D];华中科技大学;2010年

3 张迪;低强度脉冲超声波对SD大鼠前软骨干细胞增殖及细胞外基质mRNA表达的影响[D];华中科技大学;2011年

4 田U_俊;碱性成纤维细胞生长因子对兔损伤纤维环修复的实验研究[D];泰山医学院;2011年

5 李华德;纳米PLGA/HA复合物和MSC在软骨修复中的应用[D];浙江大学;2008年

6 孙铭泽;滚压载荷生物反应器促进兔软骨细胞—丝素蛋白多孔支架复合体生成功能化关节软骨的研究[D];河北医科大学;2013年

7 王s，

本文编号：396933