L-抗坏血酸在改善大鼠DCD供肝常温机械灌注灌注液中的应用研究

发布时间：2024-06-29 06:36

　　目的:探讨L-抗坏血酸应用于常温机械灌注的灌注液中的最佳浓度及对大鼠DCD供肝的缺血再灌注损伤的改善作用。方法:将24只雄性wistar大鼠随机分为静态冷保存组(static cold storage,SCS)、常温机械灌注组(normothermic machine perfusion,NMP)和L-抗坏血酸组(药物浓度梯度分组分别为1m M、2m M、5m M、10m M),每组4只大鼠。采用剪开膈肌法建立大鼠心脏死亡模型并记录时间,在心脏死亡30min后,取出大鼠肝脏,连接到大鼠肝脏体外常温携氧机械灌注系统中,灌注4h。同时设置不加L-抗坏血酸的常温机械灌注对照组与用UW液进行冷保存的对照组。在常温机械灌注过程中,分别于10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min、2h、3h、4h取灌注液1ml,检测AST、ALT、LDH、-GT水平,根据酶学水平筛选最佳L-抗坏血酸浓度;并在灌注结束后取胆汁称重;在常温机械灌注或静态冷保存4h后,留取肝组织标本行HE染色,观察DCD大鼠肝组织形态;PAS染色观察DCD大鼠肝组织糖原消耗及补充情况;分别检测D...

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【部分图文】：

图3.1大鼠离体肝脏灌流（isolatedperfusedratliver,IPRL）系统

肝素德国sigma-aldrich公司胰岛素江苏万邦生化医药集团有限责任公司异氟烷深圳市瑞沃德生命科技有限公司L-谷氨酰胺以色列BiologicalIndustries公司L-抗坏血酸德国SigmaAldrich公司双抗（青霉素、链霉....

图4.1灌注过程中AST、ALT、LDH、γ-GT变化趋势（NMP组：0mM）

第4章结果21第4章结果4.1各组肝脏灌注过程中肝脏酶学比较如图4.1为灌注过程中，10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min、120min、3h、4h,分别取灌注液检测的酶学水平，AST、ALT、LDH、γ-GT变化趋势；AST、ALT、....

图4.3肝脏HE染色与Suzuki’s病理评分a).肝脏病理切片HE染色结果图：保存结束后，HE染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50m)；b).肝脏病理切片Suzuki’s评分.(***表示p<0.001,**表示p<0.01,*表示p<0.05，n=4).μμμ

第4章结果26图4.3肝脏HE染色与Suzuki’s病理评分a).肝脏病理切片HE染色结果图：保存结束后，HE染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50m)；b).肝脏病理切片Suzuki’s评分.(***表示p<0.001,**表示p<0.01,*表示p<0.0....

图4.4肝脏PAS染色保存结束后，PAS染色照片(100倍200m、200倍100m、400倍50μμμ

第4章结果274.3各组肝脏糖原消耗比较各组肝脏保存4h后的PAS染色如图4.4所示。SCS组肝细胞糖原储存较少，基本消耗尽；NMP组肝细胞糖原储存尚可，机械灌注过程中给予补充糖原；L-抗坏血酸组（5mM）肝细胞糖原储存较好，L-抗坏血酸修复细胞，并于机械灌注过程中给予补充糖原。....

本文编号：3997312