自噬调控慢性鼻-鼻窦炎中MUC5AC表达作用的研究

发布时间：2024-02-29 22:24

　　目的:探讨自噬对慢性鼻-鼻窦炎(CRS)患者中人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)诱导的MUC5AC过表达产生的影响和作用。方法:1.QRT-PCR、IHC、ELISA检测CRSsNP、CRSwNP和对照组的鼻窦黏膜中的HNE、LC3B、JNK、AP-1和MUC5AC表达;2.体外培养人鼻黏膜上皮细胞(HNECs),用自噬体与溶酶体融合的抑制剂Bafilomycin A1处理HNE刺激的细胞,检测LC3BII的蛋白含量和MUC5AC的表达;透射电镜观察HNE处理后HNECs中的自噬体;3.自噬基因BECN1、ATG5的siRNA慢病毒载体和AP-1的siRNA慢病毒载体作用后,HNE刺激HNECs,qrt-pcr、WB、ELISA检测JNK、P-JNK、AP-1、P-AP-1、MUC5AC蛋白和MUC5AC mRNA的表达情况;JNK特异性阻断剂作用后,用重组HNE刺激,qrt-pcr、WB、ELISA检测AP-1、P-AP-1和MUC5AC蛋白及mRNA的表达情况。结果:1.与对照相比,通过qRT-PCR、IHC、ELISA发现CRSwNP和CRSsNP组的HNE、LC3B、JNK、A...

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【部分图文】：

图3.三组（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常组的鼻粘膜组织）中JNK、c-Jun的表达（×400）

16图3.三组（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常组的鼻粘膜组织）中JNK、c-Jun的表达（×400）。图A为免疫组织化学染色的图片，B为免疫组织化学结果用平均光密度值来表示。数据以点图的形式显示，包含中位数和四分位数范围，采用t检....

图4.酶联免疫吸附测定（ELISA）显示三组（15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常）

第2章CRSsNP、CRSwNP患者鼻黏膜组织中HNE、ATG5、BECN1、JNK、AP-1和MUC5AC的表达情况2.2.2鼻黏膜组织中HNE蛋白的表达30例的CRS和15例正常组的鼻黏膜组织行酶联免疫吸附（ELISA）实验：HNE蛋白的表达。....

图5.HNE，ATG5，BECN1和MUC5AC在15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常组的鼻黏膜组织中mRNA的相对表达水平

ATG5，BECN1和MUC5AC在15例CRSwNP、15例CRSsNP和15例正常组的鼻黏膜组织中mRNA的相对表达水平。数据以点图的形式显示，包含中位数和四分位数范围，采用t检验，#P>0.05，*P<0.05，***P<0.001，****P....

图6原代鼻黏膜上皮细胞（×100）

第3章体外原代鼻黏膜上皮细胞培养及实验3.2结果3.2.1原代鼻黏膜上皮细胞培养酶消化法获取细胞，将细胞接种于培养瓶后，显微镜观察见细胞呈圆形，折光性好，散在或呈小细胞团分布于培养基中，部分细胞可见纤毛摆动，24h后可见部分细胞贴壁，呈多角型，少部分细胞仍可见纤毛摆动....

本文编号：3915019