口腔鳞癌中胸腺基质淋巴细胞生成素的表达及意义分析

摘要：通过研究F0XP3和TSLP-R在口腔鳞癌浸润淋巴细胞和转移淋巴结中的共表达，我们认为，在口腔麟癌细胞中分泌的TSLP，可以通过作用于表面具有TSLP-R的淋巴细胞，促进F0XP3+Treg细胞的分化、成熟，或聚集，从而间接的调节机体组织的局部免疫微环境，给肿瘤的免疫逃逸创造了条件，促进肿瘤的发展。同时淋巴结内存在的TSLP，通过作用于TSLP-R表达阳性的淋巴细胞，诱导了 F0XP3 +的Treg淋巴细胞的分化及募集，而后者保护转移的口腔鳞癌细胞免于淋巴细胞的杀灭作用，间接的促进口腔麟癌的淋巴结转移。通过体外实验，我们又发现了口腔麟癌分泌的TSLP可通过自分泌的方式对于自身存在着潜在的促进增殖作用。

关键词：口腔鳞状细胞癌 胸腺基质淋巴细胞生成素 增殖 调节性T细胞 叉头样家族蛋白

第一部分：TSLP在口腔麟癌中的表达及临床意义的研究

前言
头颈部恶性肿瘤约占全身恶性肿瘤的5.6%，麟状细胞癌占成人病例数的80%，而口腔麟癌是比较常见的头颈部的恶性肿瘤之一。口腔麟癌的发生同全身其它类型的恶性肿瘤一样，是一个多因素多步骤的过程，致病因素主要包括不良刺激、射线等物理因素，饮酒、吸烟等化学因素，另外还与病毒感染，维生素、微量元素缺乏等因素密切相关。免疫学因素也是肿瘤发生的重要因素。各种原因导致的机体的免疫调节抑制、肿瘤细胞表面免疫抗原的改变等都可能造成机体对肿瘤细胞免疫监视的逃逸，导致肿瘤发生。
胸腺基质淋巴细胞生成素（thymiC stromal lymphopoietin，TSLP)是一种与IL 一 7相类似的细胞因子，在1994年首先由Friend从胸腺基质细胞的培养上清中分离获得（1)。针对TSLP的研究在免疫学领域较多，它不但可以促进B淋巴细胞的生长、分化以及T细胞增殖，而且还可以调控树突状细胞的成熟、活化和迁移，并且在胸腺的调节性T细胞分化中发挥重要作用（2)。胸腺基质中Hassall小体的 TSLP 可以通过诱导 CD4+CD8-CD25-T 细胞向CD4+CD25 + F0XP3+Treg细胞转化从而促进Treg细胞的产生（2)。近年来，研究发现TSLP可以在多种组织细胞中表达，包括部分肠道上皮、受刺激后的胃粘膜、食管點膜上皮、心脏、肝脏以及前列腺细胞等。另有报道TSLP还可以在人上皮细胞、基质细胞和部分肌肉细胞中表达（3，4)。TSLP不但可以通过诱导Treg细胞的分化成熟，抑制机体的免疫监视，还可以促进多种上皮细胞和肿瘤细胞的增殖。最近有多项研究发现，TSLP可以在多种实体肿瘤细胞内有表达，包括胰腺癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌及食道癌等中都有表达，并且肿瘤细胞中的TSLP的表达可能与肿瘤的发生、发展、淋巴结转移及预后相关（5)。
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材料与方法
临床资料
选取30例经病理证实口腔鳞癌组织标本，所有标本均来自山东省泰安市中心医院的入院治疗患者，患者入院前均未进行过放化疗及手术治疗，并且排除存在免疫性疾病及哮喘病病史。患者最大年龄72岁，最小32岁，中位年龄58岁，男19例，女11例。颈部淋巴结转移8例，淋巴结转移阴性22例。病理分级参照Broder分级法，其中I级25例，II - III级5例，TNM分期按照2002年UICC标准重新进行分期(6)，具体患者病例资料见表1。同时选取10例的正常口腔點膜标本作为对照，并排除哮喘、过敏体质及免疫疾病。癌旁组织来自手术的切缘组织，即距肿瘤外1.5-2cm。
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第二部分口腔鳞癌中TSLP和F0XP3的表达及关系研究

前言
前述的研究，我们已经发现了在口腔鳞癌组织中存在着大量的TSLP的分泌，众所周知，在肿瘤的发生发展中，免疫调节的改变是一个重要致病因素。各种原因导致的机体的免疫调节抑制、肿瘤细胞表面免疫抗原的改变等都可能造成机体对肿瘤细胞免疫监视的逃逸，导致肿瘤发生。了解肿瘤与免疫系统之间的相互关系能够更好的对于肿瘤进行免疫治疗。
胸腺基质淋巴细胞生成素（thymi C stromal lymphopoietin，TSLP)是一种与IL— 7相类似的细胞因子，在1994年首先由Friend从胸腺基质细胞的培养上清中分离获得（1)。针对TSLP的研究在免疫学领域较多，它不但可以促进B淋巴细胞的生长、分化以及T细胞增殖，而且还可以调控树突状细胞的成熟、活化和迁移，并且在胸腺的调节性T细胞分化中发挥重要作用（2)。胸腺基质中Hassall小体的 TSLP 可以通过诱导 CD4+CD8-CD25-T 细胞向CD4+CD25 + F0XP3+Treg细胞转化从而促进Treg细胞的产生（2)。因此TSLP在肿瘤患者微环境中也可能有类似的作用，通过诱导局部的Treg细胞的产生改变肿瘤局部的免疫微环境从而导致肿瘤的发生。
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材料与方法
临床资料
选取30例经病理证实口腔麟癌组织标本，所有标本均来自山东省泰安市中心医院的入院治疗患者，患者入院前均未进行过放化疗及手术治疗，并且排除存在免疫性疾病病史。患者最大年龄72岁，最小32岁，中位年龄58岁，男19例，女11例。其中，出现颈部淋巴结转移8例，淋巴结转移阴性22例。病理分级参照Broder分级法，其中I级25例，II - m级5例，TNM分期按照2002年UICC标准重新进行分期(6)，具体患者病例资料见表1-1。同时选取10例的正常口腔黏膜标本作为对照，并排除哮喘、过敏体质及免疫疾病。癌旁组织来自手术的切缘组织，即距肿瘤外1.5-2cm。
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第三部分 TSLP与口腔鳞癌细胞增殖的关系研究 ..............55-67 
前言 .................55-57 
材料与方法 ............57-60 
结果 ................60-61 
讨论 ...............61-65 

讨论

胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP)是一种与IL-7相类似的细胞因子，在1994年，首先由Friend从胸腺基质细胞的培养上清中分离获得了小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素（1)。人的TSLP的克隆2001年由两个独立的研究组报道（36，44)。
TSLP的主要作用是促进T淋巴细胞增殖以及B淋巴细胞的生长、分化，而且对于树突状细胞的成熟、活化和迁移具有重要的调控作用，在胸腺的调节性T细胞（Treg细胞）分化中发挥着重要作用（2)。TSLP可以促进骨髓内的DC细胞向局部淋巴结迁移，TSLP-DCs可以诱导天然T细胞向Th2细胞转化（7)。TSLP与免疫器官的功能和发展有关，而TSLP的过表达或者TSLP-R的缺失可以导致系统性的免疫疾病。前期已经有学者报道了 TSLP信号的破坏可以导致免疫的紊乱（8, 9)。TLSP在机体与环境的之间起着重要的免疫调节作用（10-13)。我们己经知道TSLP可以参与胸腺内的Treg细胞的阳性选择，并能促进CD4+T细胞介导的炎症反应（2)。TSLP可以直接活化DC细胞，促进多种细胞因子和趋化因子的释放。而最近的多项报道发现，肿瘤细胞内表达的TSLP通过促进肿瘤微环境中的Th2细胞的分化促进肿瘤的生长（5，14)。
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 总结论