自发性高血压大鼠平滑肌细胞线粒体功能的研究

发布时间：2024-02-28 10:06

　　背景：原发性高血压（Essential hypertension, EH）是人类最为常见的心血管疾病之一，也是心力衰竭、冠心病和脑卒中等疾病的重要危险因素，严重影响人类健康及寿命。目前多个研究表明线粒体基因（mtDNA）突变与高血压发病存在相关性，即母系遗传。相关研究指出，mtDNA突变可能是通过改变线粒体能量的合成、活性氧(reactive oxygen specie, ROS)的产生及钙稳态等线粒体功能来影响血压的。那么线粒体功能与EH间存在怎样的关系，在高血压中是否发生了线粒体功能的改变，发生了怎样的改变，这将为人类在线粒体基础上研究高血压发病机制提供有力的理论依据。 目的：研究自发性高血压大鼠胸主动脉平滑肌细胞（VSMCs）线粒体功能的变化。 方法：（1）取19—20周的雄性自发性高血压大鼠（SHR）及相应年龄段的雄性正常大鼠（WKY），利用贴壁法培养出VSMCs，取第3代稳定的细胞作为研究对象；（2）镜下观察、比较高血压组与正常组细胞的形态改变，利用荧光法检测细胞内ATP水平，并利用流式细胞仪检测两组细胞的ROS及线粒体膜电位水平；（3）取106的细胞，分别提取RNA，rea...

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【部分图文】：

图1制备VSMCs所用SHR大鼠

图1制备VSMCs所用SHR大鼠经75%的酒精浸泡消毒2-3min，橡皮筋迅速固定于解图2制备VSMCs的超净台要经过紫外灯常规消毒30min以上，酒精棉球擦拭超净

图2制备VSMCs的超净台在超净台中使用前要经过紫外灯常规消毒30min以上，酒精棉球擦拭超净台台面，酒精灯保

16图2制备VSMCs的超净台要经过紫外灯常规消毒30min以上，酒精棉球擦拭超净及生长特点细胞的状态与组织块被剪碎的程度以及组织碎不一时，影响了组织的铺平，一方面细胞爬出的），另外就是细胞长出的状态普遍都比较差，不得过碎或者组织块过大，细胞都不易长出。贴壁时间过长....

图3自平滑肌中组织块生长中的VSMCs（100×）

是正常大鼠平滑肌细胞一般提早半天传代。而状态好于高血压的平滑肌细胞（主要表现在细还有生长的速度等）。一般在第5天就会从平滑肌组织边缘爬出（如态大小不一，疏密程度不一，生长较为杂乱，但丰富。一般在7天左右即可以进行半换液，而底（如图4），细胞的形态大小不一，平滑肌细质丰富....

图4爬满瓶底的VSMCs（100×）

图4爬满瓶底的VSMCs（100×）胞相比，细胞间生长紧密相连，呈接触抑制性生长状态有刚长出来时透亮。图5消化后悬浮的VSMCs（100×）

本文编号：3913695