中药血清药物化学研究概况及其理论和方法拓展

  本文关键词：中药血清药物化学研究概况及其理论和方法拓展，由笔耕文化传播整理发布。

闫广利等：中药血清药物化学研究概况及其理论和方法拓展

具有性中药是在传统中医理论指导下应用的天然药物，味归经、功能主治、方剂配伍等独特的药物理论。随着中医药现代化和国际化的发展，解析中药在中医临床应用中发挥其独特疗效的药效物质基础已成为亟待解决的中医药学的关键科学问题

［1］

血清指纹图谱为导向从药材中靶向分离制备原形入血成分；收集足量给药大鼠的尿液，从中靶向分离制备代谢产物，通过质谱、核磁共振等光谱技术进行准确结构鉴定

［14］

。

随着液质联用技术，特别是超高效液相色谱串联高分辨中药血中移行成分的检测能力质谱技术的快速发展和引入，和鉴定速度得到迅速提升

［15-16］

。

［2］

中药是一个复杂的化学巨系统，传统的药效追踪分离，促进了中药血清药物化学的

及活性成分筛选的天然药物化学方法繁琐费时，虽然从中药诸如抗疟新药青蒿中成功发现了一批确有疗效的活性成分，素

［3］

［4］

、治疗老年痴呆病的石杉碱甲、治疗心脑血管病的川

Q/TOF-MS技术分析了茵普及和深化。作者首先利用UPLC-根据精陈蒿汤化学成分及灌胃给予大鼠后的血中移行成分，确质量匹配和二级质谱解析共鉴定了21个血中移行成分

［17］

芎嗪

［5］

等，但此方法是一条以发现新化合物和活性成分为主，进一步经体内经时变化规律分析，优选出具有良好体

［18］

要目的的研究模式，而不能体现中药多成分协同作用发挥整“活性成分”体生物效应的特点，所获得的对于诠释中药的作用模式及特点仍十分有限。

根据现代药物学理论，中药发挥功效的前提应该是其活性成分能够被吸收进入血液（个别直接作用肠道的药物除外），进而被输送到作用靶点，然而这个过程涉及肠道菌群代肝药酶代谢、跨膜转运吸收等生物过程，而且期间存在药谢、

物之间的相互作用，因此，中药真正发挥功效的活性成分与其所含的固有成分往往不同，只有从血中发现直接作用的活性物质及追朔前体化合物才能真正阐明表达中药临床疗效20世纪90年代初，，的药效物质基础。基于此，王喜军教授经“中药血清药物化学”过大量实践，率先提出了理论及研究内容，并将其内涵定义为：以经典的药物化学研究手段和方法为基础，运用现代分离技术及多维联用技术，分析鉴定或表征口服中药后人/动物血清中移行成分，阐明其活性与中药确定中药药效物质基础并研究其体内过程传统药效相关性，的应用科学

［6-7］

7-内行为的药动学标志成分6，二甲氧基香豆素、京尼平苷和大黄酸汤

［19］

。随后利用UPLC-Q/TOF-MS技术对茵陈四逆

［20］［21］［22］［23］

、生脉散、温心方、开心散、芍药甘草汤、双［24］

［25］［26］

、知柏地黄丸、酸枣仁汤等中药方剂的血中

黄连方

移行成分进行了分析，确定了这些方剂的潜在药效物质基MS技术进行了大量中药及复础。国内很多学者也利用LC-例如黄连解毒汤方的血中移行成分分析，丸

［28］［32］

［27］

、麝香保心

、葛根芩连汤

［29］

、四逆汤

［30］

［31］

、少腹逐瘀汤、四逆［34］、仙灵骨葆胶囊等中

散等中药方剂以及复方丹参片

［33］

使从中药口服后被吸收进入体内的成分中筛选药效物成药，

质基础的研究思路和方法成为共识。

血中移行成分的检测是中药血清药物化学的关键环节，液质联用技术为血中移行成分的检测和鉴定提供了有效的分析手段，能够更全面地获得中药体内直接作用物质的信息。然而，血中内源性成分同时也获得了良好的检测，严重必须引进液质联用数据的处理方干扰了药物成分的辨识，法

［35］

。该理论及方法体现了机体对药物的作用。质量短缺过滤技术（massdefectfiltering，MDF）主要

（吸收、代谢）和药物之间在体内过程中的相互作用，研究结果不仅揭示中药药效物质基础，为解析方剂配伍规律、阐释中药药理学特性及创新药物设计等中医药关键科学问题提供了科学有效的方法11.1

研究概况

血中移行成分分析

中药血清药物化学的根本任务是

［8-10］

用于同系物成分的提取，它通过设定适当的质量短缺范围和MS图谱进行处理，实施多重过滤对高分辨LC-过滤掉大量内源性干扰物质峰，使具有相近质量短缺值的同系物及其代谢物明显暴漏出来而易于识别碱成分

［37］

［36］

。。作者将其应用与茵陈四逆

汤中乌头生物碱类成分的提取，鉴定表征了64个乌头生物

。背景扣除（backgroudsubtraction）是以空白生物

样品为参照，将含药生物样品图谱中与空白生物样品相同的离子过滤掉的一种技术，该方法最为简单，不需要任何设置即可获得主要含有药源性成分的色谱图

［38］

解析中药药效物质基础。中药所含成分虽然复杂，但只有被吸收入血的成分才能发挥作用，这些成分包括中药所含成分的原形成分和代谢产物；通过分析中药口服给药后血液中的成分，确定中药的体内直接作用物质，是快速、准确地研究确定中药药效物质基础的有效途径。

DAD技术由于技术手段的限制，早期主要是应用HPLC-分离和鉴和柱色谱制备技术对中药血中移行成分进行分析、定

［11］

。一些药物代谢

物分析软件，例如WatersMetabolynx和UNIFY，将上述技术融为一体，并结合代谢途径的预测，实现数据自动提取与代谢物辅助鉴定除

［40］

［39］

。一些质谱仪，例如ABSCIEXTripleTOF，

能够实现数据采集前的多重质量短缺过滤和动态背景扣

，有助于减少离子抑制，增加检测灵敏度。上述技术用于对单张色谱图进行处理，然而血中移行成分确定要求进行多个动物的重现，这时每个样品都进行处理就比较繁琐，主DA）成分分析法（PCA）、正交偏最小二乘判别分析法（OPLS-等多变量统计分析方法能够提取一组样品中共有的血中移行成分，方便了血中移行成分的确定。为充分利用上述技术

。六味地黄丸血中移行成分的分析堪称是早期中药血

DAD技术对六味清药物化学应用的典范。首先利用HPLC-地黄丸及口服给予大鼠后的血中移行成分进行分析，建立含DAD指纹图谱，药血清HPLC-并通过与体外样品指纹图谱、空白血清指纹图谱进行比对，确定7个原形入血成分和4个代谢产物

［12-13］

。为对血中移行成分进行鉴定，以建立的含药

·3407·

  本文关键词：中药血清药物化学研究概况及其理论和方法拓展，由笔耕文化传播整理发布。