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镉对BV2小胶质细胞的毒性作用和机制

发布时间:2024-03-01 20:17
  镉是一种环境中广泛存在的有毒重金属,可造成肝脏、肾脏、肺脏、脾脏等多种脏器的损伤并引发多种细胞的细胞凋亡和细胞新陈代谢紊乱,同时多种疾病的致病因素之一。小胶质细胞是大脑内的免疫细胞,在病理条件下小胶质细胞被迅速激活并泌炎症相关的细胞因子参与炎症反应并介导细胞凋亡或修复损伤细胞,吞噬坏死的细胞及其细胞碎片。镉通过吸入、饮食等多种方式进入人体并影响中枢神经系统,但对镉对小胶质细胞的影响还不清楚,本研究用培养的BV2小胶质细胞研究了镉对小胶质细胞的毒性作用及其机制。为研究镉对小胶质细胞的毒性作用,本研究对培养的BV2小胶质细胞的细胞活力、凋亡水平、迁移能力、吞噬能力、炎症相关细胞因子表达、自噬水平进行了检测。首先使用MTT法检测小胶质细胞的细胞活力,以流式细胞术和荧光显微成像检测小胶质细胞凋亡水平。研究发现,氯化镉显著降低了体外培养的小胶质细胞的细胞活力并引发了细胞凋亡。为进一步研究镉对小胶质细胞的细胞功能方面的影响,本研究通过细胞划痕试验检测小胶质细胞迁移能力,使用荧光显微成像检测吞噬能力,通过q-PCR检测小胶质细胞炎症相关细胞因子的表达水平。结果表明,氯化镉显著降低了小胶质细胞的细胞迁...

【文章页数】:58 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 镉
        1.1.1 重金属镉简介
        1.1.2 镉的危害
        1.1.3 镉与免疫
    1.2 小胶质细胞
        1.2.1 小胶质细胞简介
        1.2.2 小胶质细胞来源
        1.2.3 小胶质细胞功能
        1.2.4 小胶质细胞与疾病
    1.3 镉与小胶质细胞
    1.4 自噬
        1.4.1 自噬简介
        1.4.2 自噬与免疫
        1.4.3 自噬与中枢神经系统
        1.4.4 自噬与小胶质细胞
        1.4.5 自噬与镉
    1.5 镉、小胶质细胞以及自噬三者的关系
    1.6 研究目的与意义
第二章 材料和方法
    2.1 BV2小胶质细胞来源
    2.2 实验器材
    2.3 实验仪器
    2.4 主要试剂及其配制
    2.5 实验方法
        2.5.1 BV2小胶质细胞的复苏
        2.5.2 BV2小胶质细胞的传代
        2.5.3 BV2小胶质细胞的接种
        2.5.4 MTT法检测BV2小胶质细胞细胞活力
        2.5.5 细胞凋亡检测
        2.5.6 Westernblotting检测细胞蛋白表达水平
        2.5.7 细胞迁移能力检测
        2.5.8 细胞吞噬能力检测
        2.5.9 Q-PCR检测炎症相关细胞因子的表达
    2.6 数据统计及分析
第三章 实验结果
    3.1 不同剂量镉对BV2小胶质细胞活力的影响
    3.2 不同剂量镉对BV2小胶质细胞凋亡情况的影响
    3.3 镉对BV2小胶质细胞核形态的影响
    3.4 不同剂量镉对BV2小胶质细胞细胞迁移能力的影响
    3.5 镉对BV2小胶质细胞细胞吞噬能力的影响
    3.6 镉对小胶质细胞炎症相关细胞因子分泌的影响
    3.7 不同剂量镉对BV2小胶质细胞自噬的影响
    3.8 雷帕霉素对镉引起的小胶质细胞自噬抑制的影响
    3.9 雷帕霉素对镉引起的小胶质细胞凋亡的影响
第四章 讨论
    4.1 镉抑制小胶质细胞的细胞活力
    4.2 镉引发小胶质细胞的凋亡
    4.3 镉抑制小胶质细胞的正常细胞功能
    4.4 镉抑制小胶质细胞的自噬
    4.5 镉可能通过抑制小胶质细胞自噬影响细胞凋亡水平
第五章 结论
    5.1 本研究主要结论
    5.2 研究展望
参考文献
在学期间研究成果
附录 缩略词表
致谢



本文编号:3915777

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