SMUG1和5-FU对小鼠卵子和植入前胚胎发育作用的研究

发布时间：2024-03-06 00:38

　　SMUG1(Single-strand-selective monofunctional uracil DNA glycosylase 1)是单链选择性单功能尿嘧啶DNA糖基化酶1,能够引发碱基切除修复(Base Excision Repair,BER)途径,切除掺入到DNA中的尿嘧啶、5-羟甲基尿嘧啶(5-hydroxymethyluracil,5-hmU)和5-氟尿嘧啶(5-fluoropyrimidines,5-FU)。5-FU是一种抗代谢药物,被广泛使用于肿瘤的化学治疗。在第一部分的实验研究中,我们首先利用免疫荧光染色法检测了SMUG1在卵母细胞和早期胚胎中的定位。接着通过SMUG1-Morpholino特异性地敲低了SMUG1,并探讨了其在卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中所起的作用。最后检测了SMUG1对合子DNA去甲基化进程的影响。结果表明,SMUG1在卵母细胞和早期胚胎的各阶段均有表达,且主要定位在细胞核中。SMUG1的敲低不会对卵母细胞的成熟进程产生影响,但会显著抑制早期胚胎的发育。此外,在1-细胞胚胎中敲低SMUG1不会影响DNA去甲基化进程。在第二部分的实验研究中,...

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图1.1SMUG1的结构示意图

3图1.1SMUG1的结构示意图[8]G1的二级结构图像，彩虹颜色从蓝色到红色表示从N端到C端。图（B）螺旋，绿色表示β折叠，黄色表示卷曲。（C）一对立体的SMUG1，显示）显示了分子表面的缝隙和凹陷嘧啶结合处。Figure1.1SMUG1Struc....

图1.2卵母细胞向胚胎转化过程中的DNA甲基化动态[12]

受精不久后，父本基因组迅速发生去甲基化，在原核晚期，雄原核中5-hmC远高于5-mC（如图1.2）[14,15]。图1.2卵母细胞向胚胎转化过程中的DNA甲基化动态[12]父本和母本的基因组在受精后经历了复杂的、不同的DNA去甲基化进程。在合子S期前，TET酶会介导去除雄原核....

图1.3DNA去甲基化途径[24]

图1.3DNA去甲基化途径[24]5-mC去甲基化背后最合理的机制涉及到TET蛋白，其参与了5-mC到5-hmC的氧化；后者进一步成为5-fC和5-caC。然后，激活DNA糖基化酶TDG的碱基切除修复途径以修复上述碱基修饰（5-fCC）并用胞嘧啶取代....

图1.4DNA去甲基化过程中RNA和蛋白质表达热图

图1.4DNA去甲基化过程中RNA和蛋白质表达热图[25]小鼠早期胚胎从合子到囊胚的发育过程中，SMUG1的RNA和蛋白质均表现出了逐渐下降的趋势。Figure1.4RNAandproteinexpressionprofilesrepresentedasheat....

本文编号：3920286