黄嘌呤氧化酶多酚抑制剂的筛选及其作用机制

发布时间：2024-03-20 03:35

　　黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)是人体内次黄嘌呤和黄嘌呤代谢产生尿酸的关键酶,而多酚单体可抑制黄嘌呤氧化酶从而减少尿酸合成进而缓解痛风症状。为探究来源于天然产物的多酚单体对XOD的抑制作用机制,首先研究几种常见活性较好的多酚单体对黄嘌呤氧化酶的抑制率,及其对XOD的抑制动力学,并且通过荧光猝灭实验与分子对接模拟多酚单体与XOD之间的相互作用形式。在6种多酚单体中,白藜芦醇、表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和橙皮苷对黄嘌呤氧化酶活性的抑制效果较好,室温下IC50分别为261.22、150.51、97.08μmol/L,是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂。荧光猝灭实验表明,单体与XOD结合使酶的内源荧光发生了猝灭现象,猝灭机制为静态猝灭。分子对接模拟表明,多酚单体能与XOD的氨基酸残基结合,结合位点位于钼蝶呤(molybdopterin,Mo-Pt)辅因子或黄素腺嘌呤二核苷酸(flavine-adenine dinucleotide,FAD)结构域的异恶嗪环附近。多酚单体是有效的XOD竞争性抑制剂,可以通过抑制黄嘌呤氧...

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

图1不同浓度下6种多酚单体及阳性对照别嘌呤醇的抑制率和IC50

6种多酚单体和别嘌呤醇对XOD都有抑制效果，抑制率随多酚单体和别嘌呤醇浓度的升高而不断增加，呈现剂量效应关系（图1A）。多酚单体和阳性对照（别嘌呤醇）对XOD抑制率的回归分析结果即半数抑制浓度（IC50）见图1B。所有单体对XOD活性均表现有抑制作用，其中EGCG、白藜芦醇、橙皮....

图3EGCG、白藜芦醇、橙皮苷对XOD的抑制常数判定图

从大理藜芦（百合科）的根和茎甲醇提取物分离出的白藜芦醇等5种多酚，对XOD活性具有抑制作用，并呈剂量依赖型关系，其中白藜芦醇对XOD的抑制效果与本研究结果一致，抑制率的IC50值为66.1μmol/L，对XOD的抑制类型也为竞争性抑制[23]。Aucamp等[24]研究了5种儿茶....

图3EGCG、白藜芦醇、橙皮苷对XOD的抑制常数判定图

图3EGCG、白藜芦醇、橙皮苷对XOD的抑制常数判定图2.3单体与XOD荧光猝灭光谱

图2EGCG、白藜芦醇、橙皮苷对XOD的抑制类型判定图

可以看出，EGCG、白藜芦醇、橙皮苷随着因变量的增加直线的斜率不断降低，由此推断三者对XOD的抑制作用属于可逆抑制作用[21],Lineweaver-Burk曲线表现出典型的竞争性抑制特征，表明三种单体是XOD的竞争性抑制剂[22]。采用Dixon作图法，取两个不同底物浓度[s]....

本文编号：3932898