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成纤维细胞生长因子21在大肠杆菌细胞周质中的表达

发布时间:2017-06-12 22:05

  本文关键词:成纤维细胞生长因子21在大肠杆菌细胞周质中的表达,,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:成纤维细胞生长因子21(FGF21)是近期发现的糖脂代谢调节因子,其安全、有效和不依赖胰岛素调节血糖的特点,使其有望成为治疗糖尿病的新型药物。为研究人FGF21(h-FGF21)在大肠杆菌细胞周质表达,本实验在pET27b载体PelB(pectate lyase B)信号肽下游连入h-FGF21基因,成功构建了pET27bPelB-h-FGF21重组质粒,并发现pET27bPelB-h-FGF21转化E.coliBL21(含DE3)经诱导后能够在细胞周质成功地表达h-FGF21,表明PelB信号肽在h-FGF21细胞周质表达中起到了关键作用。经周质蛋白提取和两步离子交换层析,利用灰度分析软件分析得到了纯度大于95%的h-FGF21蛋白,SDS-PAGE与Western blotting结果证明了目的蛋白大小约20 k Da;经HepG2细胞的葡萄糖吸收实验以及在II型糖尿病db/db小鼠上的短期和长期血糖变化实验结果表明,细胞周质表达的h-FGF21(ph-FGF21)与胞内表达的FGF21(ih-FGF21)的生物学活性在统计学上无显著差异。
【作者单位】: 东北农业大学生命科学学院;河南师范大学生命科学学院;
【关键词】成纤维细胞生长因子- 信号肽 周质空间表达 糖尿病
【基金】:黑龙江省应用技术研究与开发计划项目资助(GC13C104)
【分类号】:R96
【正文快照】: 成纤维细胞生长因子21(FGF21)是FGF家族中FGF19亚家族成员之一,主要表达在肝脏中,其主要作用靶器官有肝脏、脂肪和胰腺等[1],FGF21可以不依赖于胰岛素信号通路安全有效调节血糖[2],不会产生低血糖、水肿和过敏等不良反应[3]。除此之外,大量动物实验表明,FGF21可以有效改善胰岛

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本文编号:445022

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