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下调miR-155的表达对人A549/DDP细胞株顺铂耐药性的影响及机制

发布时间:2024-06-28 19:43
  背景与目的:肺癌已成为全球范围内发病率与病死率均居首位的恶性肿瘤。化疗是进展期非小细胞肺癌重要的治疗手段,但是临床上常常由于癌细胞对药物耐药导致化疗失败。近来研究表明非蛋白编码小分子RNA(miRNA)能通过基因突变、调节肿瘤相关靶基因及增殖凋亡相关基因影响肺癌的发生发展及药物的敏感性。miR-155作为miRNA家族中的一种,大量研究也证实其参与了多种恶性肿瘤的发生发展与耐药,但miR-155在肺癌中所担当的角色及影响肺癌的相关机制仍存在争议。本研究通过观察miR-155在A549及其耐药细胞株A549/DDP中的表达差异,探究其对肺癌细胞及顺铂敏感性的影响及机制,为耐药型肺腺癌的个体化治疗提供新的思路。方法:1.细胞培养:人肺腺癌A549、A549/DDP细胞株在RPMI-1640完全培养基(含10%胎牛血清及1%青链霉素混合液)中生长,并放于具有适宜条件的细胞培养箱中(37℃,5%CO2,饱和湿度)。(A549/DDP细胞培养基中加入终浓度为1μg/ml的顺铂以维持其耐药性。)2.耐药株的鉴定及miR-155及TP53INP1m RNA表达差异的检测:MTT法检测A549/DDP...

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图2顺铂对A549/DDP及A549细胞的IC50值

图2顺铂对A549/DDP及A549细胞的IC50值

差异具有统计学意义(t=17.36,P=0.001)(见图2)。0102030405060020406080100120A549/DDP细细A549细细顺顺顺顺(μmol/L)细细胞胞(%)图1A549/DDP及A549....


图6三组中TP53INP1的蛋白的Western-blot图像

图6三组中TP53INP1的蛋白的Western-blot图像

A549/DDP细胞转染miR155抑制剂前后TP53INP1蛋白表达以GAPDH为内参,进行Western-blot检测三组中TP53INP1蛋白的表见图6)。未转染组、空转染组及抑制剂组中TP53INP1蛋白的相对表(见表1)。miR155抑制....


图9顺铂对三组细胞IC50值

图9顺铂对三组细胞IC50值

图8不同浓度顺铂作用下各组细胞的生长抑制曲线0102030405060020406080100120未未未胞空未未胞抑抑抑胞顺顺顺顺(μmol/L)细细胞胞(%)


图10三组中Bcl-2蛋白和Bax蛋白的Western-blot图像

图10三组中Bcl-2蛋白和Bax蛋白的Western-blot图像

rn-blot检测A549/DDP细胞转染miR155抑x蛋白表达水平DH为内参,进行Western-blot检测三组中Bcl-2、Ba2、图10)。miR155抑制剂转染A549/DDP后,与未转l-2蛋白表达水平显著上调(图11),Bax表达....



本文编号:3996587

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