S100A9在口腔肿瘤生长与增殖中的调控作用

发布时间：2017-07-05 23:17

  本文关键词：S100A9在口腔肿瘤生长与增殖中的调控作用

  更多相关文章： 口腔肿瘤 S100A9 实时荧光定量PCR 细胞划痕实验 MTT

【摘要】：目的研究S100A9在涎腺肿瘤及正常涎腺组织中的表达水平,并分析S100A9对SCC-3细胞的增殖和迁移的影响,了解S100A9在口腔肿瘤的发生发展过程中可能所起的作用,可能为口腔肿瘤的早期临床诊断及预后评估提供新方法。方法通过收集15例涎腺肿瘤手术的良性肿瘤标本(多形性腺瘤)及瘤旁正常组织标本,抽提出收集标本组织的总RNA,逆转录为c DNA,再采用实时荧光定量PCR的技术方法检测出肿瘤及正常组织中S100A9 m RNA的表达水平。采用RNA干扰技术,构建出S100A9 sh RNA,沉默和过表达S100A9,利用大肠杆菌感受态细胞DH 5α进行了转化实验,使用293T细胞来包装慢病毒,再使慢病毒载体感染SCC-3细胞。应用细胞划痕实验来检测S100A9沉默组和S100A9过表达组分别与对照组相比对SCC-3细胞迁移的影响。应用噻唑蓝MTT比色实验来检测S100A9沉默组和S100A9过表达组分别与对照组相比对SCC-3细胞的生长活力和增殖能力的影响。结果1.实时荧光定量PCR实验的结果显示:与正常组织相比,15组肿瘤样本中,有10组肿瘤组织中S100A9 m RNA高表达,5组肿瘤组织中的S100A9 m RNA为低表达,经统计学分析,p0.05,15组肿瘤组织中S100A9 m RNA表达水平与正常组有显著差异,且为高表达。2.细胞划痕实验的结果显示:在划痕后24h,S100A9过表达组的SCC-3细胞迁移速度明显高于对照组,S100A9沉默组的SCC-3细胞的迁移速度与对照组相比,细胞的迁移速度明显低于对照组细胞的迁移速度。3.噻唑蓝MTT比色实验的结果显示:在0h,12h,24h,48h,S100A9过表达组中相对SCC-3细胞数目均高于对照组,而S100A9沉默组的相对SCC-3细胞数目明显低于同一时间下的对照组的细胞数目。结论1.S100A9在涎腺肿瘤中的表达量明显高于正常涎腺组织,两组间有明显差异,说明S100A9可能与口腔肿瘤的发生有关。2.当S100A9过表达时,细胞的增殖及迁移明显高于正常组。3.当沉默S100A9时,细胞的增殖和迁移相对于对照组的细胞情况来说受到了明显的抑制。综上所述,S100A9可能在口腔肿瘤的发生发展中发挥着重要的作用,可能成为口腔肿瘤的特异性标志物,可能有利于对口腔肿瘤患者的早期诊断及预后评估,但是S100A9在口腔肿瘤中具体的作用机制还需要我们进一步的研究。
【关键词】：口腔肿瘤 S100A9 实时荧光定量PCR 细胞划痕实验 MTT
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.85
【目录】：

• 中英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 1 前言10-16
• 2 实验方法与材料16-27
• 3 结果27-30
• 4 讨论30-32
• 5 结论32-34
• 参考文献34-39
• 附录39-40
• 致谢40-41
• 综述41-47
• 参考文献45-47

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本文编号：523992